24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2353  |  回复: 10

指甲刀小魔

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] DNA电泳需要回收100bp的片段 每次都找不到条带 已有1人参与

一个质粒(只由目的片段与载体骨架组成),需要回收的片段只有100多bp,两边有二型酶切位点BsaI,载体骨架就是pMD19T simple 。骨架全长2.6k,骨架上也有一个BsaI位点,在骨架正中间的位置,所以用BsaI切,会产生两个1.3k和一个100多bp的目标条带。但酶切后用500bp的marker,胶浓度1% 2% 3%都试了,就是只能跑出1.3k的条带,目标条带太小没有办法显示回收 怎么办啊 求助

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

HappyKuan

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

酶切的量够不够,50ul酶切5ug质粒再跑胶试试

发自小木虫Android客户端
2楼2017-05-16 07:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

禁虫

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-17 07:43:29
片段太小了,酶切之后不太容易看见,你可以将质粒进行单酶切,然后pcr回收
···
3楼2017-05-16 08:42:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

禁虫

引用回帖:
5楼: Originally posted by 指甲刀小魔 at 2017-05-16 23:38:41
两边的酶切位点是一样的
...

那就不要酶切了,直接p

发自小木虫Android客户端
···
6楼2017-05-16 23:43:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张自生

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

100bp很小了,不管EB还是什么,结合的染料都很少,很难看到,有时候我们曝光后隐约看到就切胶回收,再与载体连接,运气好还能连接成功的

发自小木虫Android客户端
7楼2017-05-17 00:19:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

指甲刀小魔

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
2楼: Originally posted by HappyKuan at 2017-05-16 07:43:11
酶切的量够不够,50ul酶切5ug质粒再跑胶试试

好的

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-05-16 23:38:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

指甲刀小魔

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小冀- at 2017-05-16 08:42:28
片段太小了,酶切之后不太容易看见,你可以将质粒进行单酶切,然后pcr回收

两边的酶切位点是一样的

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-05-16 23:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

指甲刀小魔

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小冀- at 2017-05-16 23:43:38
那就不要酶切了,直接p
...

嗯嗯好的

发自小木虫IOS客户端
8楼2017-05-18 08:34:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

指甲刀小魔

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
7楼: Originally posted by 张自生 at 2017-05-17 00:19:43
100bp很小了,不管EB还是什么,结合的染料都很少,很难看到,有时候我们曝光后隐约看到就切胶回收,再与载体连接,运气好还能连接成功的

是的啊 好忧伤

发自小木虫IOS客户端
9楼2017-05-18 08:38:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1215216349

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
7楼: Originally posted by 张自生 at 2017-05-17 00:19:43
100bp很小了,不管EB还是什么,结合的染料都很少,很难看到,有时候我们曝光后隐约看到就切胶回收,再与载体连接,运气好还能连接成功的

玄学啊
Nice to meet you!
10楼2017-05-24 11:38:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 指甲刀小魔 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研生物与医药调剂 +7 铁憨憨123425 2026-03-31 7/350 2026-04-01 08:45 by JourneyLucky
[教师之家] 张雪峰戛然而止的飞驰人生 +3 yexuqing 2026-03-26 4/200 2026-04-01 08:20 by 湖心亭看雪
[考研] 359求调剂 +8 邓邓邓书书 2026-03-25 8/400 2026-04-01 08:20 by herarysara
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +8 nhj_ 2026-03-25 8/400 2026-04-01 08:08 by yanflower7133
[考研] 环境工程 085701,267求调剂 +14 minht 2026-03-29 15/750 2026-04-01 07:23 by sunshine0013
[电化学] 070300化学调剂 +7 山顶见α 2026-03-25 7/350 2026-03-31 22:21 by piaoyi415
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +18 荷包蛋hyj 2026-03-26 18/900 2026-03-31 18:08 by 544594351
[考研] 340求调剂 +4 希望如此i 2026-03-31 4/200 2026-03-31 16:40 by 690616278
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +6 hanamiko 2026-03-30 6/300 2026-03-31 12:19 by 唐沐儿
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +6 星沉uu 2026-03-26 7/350 2026-03-31 10:19 by GdShizy
[考研] 0817化工学硕调剂 +7 努力上岸中! 2026-03-31 7/350 2026-03-31 09:58 by nalakaiqi
[考研] 08工科求调剂286 +5 tgs_001 2026-03-28 5/250 2026-03-31 08:18 by 一只好果子?
[考研] 296求调剂 +10 彼岸t 2026-03-29 10/500 2026-03-30 10:50 by 探123
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
信息提示
请填处理意见