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dellxiong

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[交流] 有关必赤酵母表达胰岛素的问题

大家好，我最近在做必赤酵母表达人胰岛素的课题，用pPIC9K载体，SalI线性化后转到必赤酵母，G418抗性筛选高拷贝，PCR验证插入基因，但是在进行三角瓶甲醇诱导筛选的时候，电泳没有条带。是不是我目的蛋白没有表达，请高手们帮我分析一下。

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1楼 2017-05-12 12:51:15

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dellxiong

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有没有大神给点建议！

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2楼2017-08-05 10:22:52

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-字仲康

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
dellxiong: 金币+1 2017-08-11 09:43:51

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3楼2017-08-05 11:54:37

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引用回帖:

3楼: Originally posted by -字仲康 at 2017-08-05 11:54:37
胰岛素的蛋白分子量比较小，确认以下是否是蛋白电泳跑得不好而导致的结果。胰岛素的看看药典，很多都应该有液相的检测方法了，你用液相检测吧。还有是摇瓶可能表达比较低的，你看看你的蛋白要浓缩一下

师兄您好，我查阅了很多中外文的文献，有不少都是直接取菌夜上清 PAGE电泳。不知道靠不靠谱。能留下一个邮箱联系么，谢谢！