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xingkong544

铜虫 (小有名气)

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[求助] 高效液相色谱测单糖（紫外检测器）已有2人参与

各位虫友们，本人已被这个问题困扰很久，求助万能的虫友们…我想咨询下，Pmp衍生化测单糖，对单糖的浓度有什么要求吗？浓度梯度是怎么确定的啊？我用的单糖的浓度梯度是0.2g/L~1g/L共5个浓度梯度…发现峰面积并不是成比例的…心累啊…再者，PMp的浓度按文献稀释了10倍，峰高还是3000mA左右…会不会太高…和衍生物的峰高放在一起，谱图画面有点不和谐啊！对于PMp过量的问题，要达到多少就可以呢？有什么要求吗？这个衍生化反应的彻底吗？查了几篇文献，并没有看到这方面的说法…还请虫友们指教…

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1楼 2017-05-11 10:17:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xingkong544

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引用回帖:

4楼: Originally posted by shi102241218 at 2017-05-11 17:09:22
信号只和糖浓度相关，和别的没关系

您好，我把原溶液按比例稀释后又做了一遍，发现所有的单糖几乎会在同一个位置出峰，（因为杂峰比较多，只能先单个单糖跑，确定他的出峰位置，再跑混标。我单跑6种单糖的时候，发现每种单糖的出峰时间非常相似，根本分不开，还有就是，一个特别奇怪的现象，我的单糖事是按比例稀释的，但是跑出的峰面积线性关系还是非常差。）而且流动相磷酸盐缓冲液和乙腈的比例也调了，调的乙腈体积分数最低为13%，PMp大概10min左右出峰吧，但是它拖尾特别严重，拖了大概10min的样子，总共跑了40min左右的样子，一直都没有峰出现。我已经很小心地在配溶液了。心累…快要崩溃了~我现在陷入了迷茫之中…还请您再指点迷津…万分感谢。。谢谢您！

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