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xingkong544

铜虫 (小有名气)

[求助] 高效液相色谱测单糖(紫外检测器) 已有2人参与

各位虫友们,本人已被这个问题困扰很久,求助万能的虫友们…我想咨询下,Pmp衍生化测单糖,对单糖的浓度有什么要求吗?浓度梯度是怎么确定的啊?我用的单糖的浓度梯度是0.2g/L~1g/L共5个浓度梯度…发现峰面积并不是成比例的…心累啊…再者,PMp的浓度按文献稀释了10倍,峰高还是3000mA左右…会不会太高…和衍生物的峰高放在一起,谱图画面有点不和谐啊!对于PMp过量的问题,要达到多少就可以呢?有什么要求吗?这个衍生化反应的彻底吗?查了几篇文献,并没有看到这方面的说法…还请虫友们指教…

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xingkong544

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
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2楼: Originally posted by shi102241218 at 2017-05-11 10:33:30
你的浓度太高了,这个浓度应该用示差折光检测器。照着100到1000倍稀释吧

好的,谢谢您的意见。我按照您的意见再做一次,那我是不是可以把PMp浓度降一点?如果按文献中的0.5M感觉是理论量的千倍了快…会不会超出检测上限…

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3楼2017-05-11 10:54:53
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shi102241218

木虫 (著名写手)

你的浓度太高了,这个浓度应该用示差折光检测器。照着100到1000倍稀释吧

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2017-05-11 10:33:30
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shi102241218

木虫 (著名写手)

信号只和糖浓度相关,和别的没关系

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2017-05-11 17:09:22
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xingkong544

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by shi102241218 at 2017-05-11 17:09:22
信号只和糖浓度相关,和别的没关系

您好,我把原溶液按比例稀释后又做了一遍,发现所有的单糖几乎会在同一个位置出峰,(因为杂峰比较多,只能先单个单糖跑,确定他的出峰位置,再跑混标。我单跑6种单糖的时候,发现每种单糖的出峰时间非常相似,根本分不开,还有就是,一个特别奇怪的现象,我的单糖事是按比例稀释的,但是跑出的峰面积线性关系还是非常差。)而且流动相磷酸盐缓冲液和乙腈的比例也调了,调的乙腈体积分数最低为13%,PMp大概10min左右出峰吧,但是它拖尾特别严重,拖了大概10min的样子,总共跑了40min左右的样子,一直都没有峰出现。我已经很小心地在配溶液了。心累…快要崩溃了~我现在陷入了迷茫之中…还请您再指点迷津…万分感谢。。谢谢您!

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5楼2017-05-17 09:44:31
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