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十字幻影

木虫 (正式写手)

小小龙

[求助] 测序有酶切位点却用酶切不来

如题,构建了一个质粒,测序有XbaI酶切位点,但是用XbaI酶却切不开。试了好几管酶,应该不是酶失活。这个质粒用别的酶能够切开。想问问有人也碰到过这个问题吗??谢谢

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stevenshi021

新虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-11 07:48:32
有可能单酶切和质粒条带重叠一起,用一个长胶慢慢跑。另外最好再用一个其它质粒试试你的酶。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2017-05-10 17:50:29
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十字幻影

木虫 (正式写手)

小小龙

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引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2017-05-10 17:50:29
有可能单酶切和质粒条带重叠一起,用一个长胶慢慢跑。另外最好再用一个其它质粒试试你的酶。

谢谢你的回复,也许是某些因素切的慢,我再用长胶试试,谢谢。

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脚踏实地,仰望星空
3楼2017-05-10 20:46:05
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ljp7786

铜虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-11 07:48:44
有可能位点被甲基化了,你把质粒转到甲基化不敏感的菌株里如全式金产的trans110里,再提取这个菌株里的质粒酶切就能切开了。

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4楼2017-05-10 21:14:03
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