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为什么用FDA/PI染色后所有细胞全部同时发绿色荧光和红色荧光。 已有4人参与
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题主小硕一枚，刚开始接触细胞培养。求教下为什么用FDA/PI染色后所有细胞全部同时发绿色荧光和红色荧光。 我养的是HUVEC细胞，在24孔板内接种了10^5个细胞培养了24小时，用的5mg/ml的FDA/PI，按照1:1000加入PBS稀释后避光染色5分钟，然后在倒置荧光显微镜下拍照，结果显示，在绿色荧光下所有细胞都显示绿色，然后在红色荧光下所用的细胞又全部变成了红色。我原来理解的是应该是活细胞发绿色荧光，死了的发红色荧光，但是现在的是发绿色荧光和发红色荧光的细胞完全重叠  ，所以想向各位大牛请教下，这是怎么一回事？ |
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2楼2017-05-09 20:55:15
yyy0305
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3楼2017-05-10 12:29:36
yyy0305
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4楼2017-05-10 12:33:31
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我没养过细胞，但是做过免疫染色。我也觉得你是不是燃料没清理干净，导致背景杂乱所以看到到处都是。再要么就是你要分清楚你看到的是否是荧光信号，普通荧光显微镜肉眼观察的时候，很多物质在激发光的照射下都能展现出较弱的类似于有荧光的状态，所以最好是有对照组，没有染的好的做参考也得有个空白对照 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-05-10 21:17:50
sun-donghong
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