| 查看: 14726 | 回复: 14 | ||
[求助]
为什么用FDA/PI染色后所有细胞全部同时发绿色荧光和红色荧光。 已有4人参与
|
|
题主小硕一枚，刚开始接触细胞培养。求教下为什么用FDA/PI染色后所有细胞全部同时发绿色荧光和红色荧光。 我养的是HUVEC细胞，在24孔板内接种了10^5个细胞培养了24小时，用的5mg/ml的FDA/PI，按照1:1000加入PBS稀释后避光染色5分钟，然后在倒置荧光显微镜下拍照，结果显示，在绿色荧光下所有细胞都显示绿色，然后在红色荧光下所用的细胞又全部变成了红色。我原来理解的是应该是活细胞发绿色荧光，死了的发红色荧光，但是现在的是发绿色荧光和发红色荧光的细胞完全重叠  ，所以想向各位大牛请教下，这是怎么一回事？ |
回复此楼» 猜你喜欢
梦想
已经有8人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有19人回复
-
面上合作单位盖章
已经有9人回复
-
面上函评意见出来了，像什么等级？
已经有17人回复
-
为什么国自然不能直接公布
已经有5人回复
-
学科评审组评审是指会评吗？
已经有4人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有14人回复
-
小白求助 投论文要求的highlights应该如何写
已经有4人回复
-
麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上）
已经有12人回复
-
怎么看青基中了没有啊
已经有6人回复
2楼2017-05-09 20:55:15
yyy0305
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 114 (高中生)
- 金币: 9567.5
- 散金: 50
- 红花: 30
- 帖子: 1486
- 在线: 383.6小时
- 虫号: 1571969
- 注册: 2012-01-10
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
3楼2017-05-10 12:29:36
yyy0305
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 114 (高中生)
- 金币: 9567.5
- 散金: 50
- 红花: 30
- 帖子: 1486
- 在线: 383.6小时
- 虫号: 1571969
- 注册: 2012-01-10
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
4楼2017-05-10 12:33:31
|
我没养过细胞，但是做过免疫染色。我也觉得你是不是燃料没清理干净，导致背景杂乱所以看到到处都是。再要么就是你要分清楚你看到的是否是荧光信号，普通荧光显微镜肉眼观察的时候，很多物质在激发光的照射下都能展现出较弱的类似于有荧光的状态，所以最好是有对照组，没有染的好的做参考也得有个空白对照 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-05-10 21:17:50
sun-donghong
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1479.3
- 散金: 3040
- 红花: 10
- 帖子: 553
- 在线: 179.6小时
- 虫号: 4210404
- 注册: 2015-11-10
- 专业: 细胞周期与调控
6楼2017-05-13 14:24:22
7楼2017-06-22 20:22:35
8楼2017-12-11 15:39:56
9楼2017-12-24 17:00:03
|
本帖内容被屏蔽 |
10楼2018-06-05 16:51:34
20