| 查看: 14429 | 回复: 14 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
为什么用FDA/PI染色后所有细胞全部同时发绿色荧光和红色荧光。 已有4人参与
|
||
|
题主小硕一枚，刚开始接触细胞培养。求教下为什么用FDA/PI染色后所有细胞全部同时发绿色荧光和红色荧光。 我养的是HUVEC细胞，在24孔板内接种了10^5个细胞培养了24小时，用的5mg/ml的FDA/PI，按照1:1000加入PBS稀释后避光染色5分钟，然后在倒置荧光显微镜下拍照，结果显示，在绿色荧光下所有细胞都显示绿色，然后在红色荧光下所用的细胞又全部变成了红色。我原来理解的是应该是活细胞发绿色荧光，死了的发红色荧光，但是现在的是发绿色荧光和发红色荧光的细胞完全重叠  ，所以想向各位大牛请教下，这是怎么一回事？ |
回复此楼» 猜你喜欢
药学硕士，第一、第二作者已发表6 篇 SCI，药理方向及相关方向2026年/2027年博士申请
已经有4人回复
-
26年博士申请自荐-电催化
已经有3人回复
-
中国地质大学（北京）博士招生补录，数理学院材料科学与工程专业和材料与化工专业
已经有6人回复
-
收到国自然专家邀请后几年才会有本子送过来评
已经有4人回复
-
考博
已经有5人回复
-
26年申博自荐-计算机视觉
已经有4人回复
-
药化及相关博士的申请
已经有3人回复
-
一篇MDPI论文改变了学习工作和生活
已经有4人回复
yyy0305
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 114 (高中生)
- 金币: 9565.5
- 散金: 50
- 红花: 30
- 帖子: 1484
- 在线: 383小时
- 虫号: 1571969
- 注册: 2012-01-10
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
3楼2017-05-10 12:29:36
2楼2017-05-09 20:55:15
yyy0305
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 114 (高中生)
- 金币: 9565.5
- 散金: 50
- 红花: 30
- 帖子: 1484
- 在线: 383小时
- 虫号: 1571969
- 注册: 2012-01-10
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
4楼2017-05-10 12:33:31
|
我没养过细胞，但是做过免疫染色。我也觉得你是不是燃料没清理干净，导致背景杂乱所以看到到处都是。再要么就是你要分清楚你看到的是否是荧光信号，普通荧光显微镜肉眼观察的时候，很多物质在激发光的照射下都能展现出较弱的类似于有荧光的状态，所以最好是有对照组，没有染的好的做参考也得有个空白对照 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-05-10 21:17:50