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timberstar

新虫 (初入文坛)

感受态效率太低了。试试超级感受态

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11楼2017-05-11 17:19:48
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Zhibao1994

新虫 (小有名气)

12楼2017-05-11 19:40:08
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海忆梦奇

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by HZNU2013 at 2017-05-10 07:53:08
转化弄杆菌:冰置30分钟,37度1分钟液氮2分钟重复一次,冰置5分钟,加不含抗生素LB,30度摇3个小时,涂板,30度倒置培养过夜。

弱弱问一下,涂板前的摇菌不小心加上抗生素了,还能长菌吗?
13楼2017-05-12 11:45:48
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Romanticman

新虫 (正式写手)

兄弟啊,你这么搞,老板不打你就不错了转化

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14楼2017-05-12 20:14:14
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Romanticman

新虫 (正式写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by Romanticman at 2017-05-12 20:14:14
兄弟啊,你这么搞,老板不打你就不错了转化

手快,点了,哈哈,可以参考一下
质粒转化实验



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15楼2017-05-12 20:17:36
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Romanticman

新虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 海忆梦奇 at 2017-05-12 11:45:48
弱弱问一下,涂板前的摇菌不小心加上抗生素了,还能长菌吗?...

转化后摇菌不加抗生素啊,难道你们城里人有新花样,哈哈

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16楼2017-05-12 20:20:49
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预估预估

新虫 (正式写手)

17楼2017-05-12 23:08:07
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Zhibao1994

新虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by Romanticman at 2017-05-12 20:14:14
兄弟啊,你这么搞,老板不打你就不错了转化

为啥打我。就因为我把DH5a记成了农杆菌吗?表示之前一直以为做的是农杆菌,其实一直做的是大肠杆菌。农杆菌的感受态细胞还在冰箱里。

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18楼2017-05-13 09:48:07
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Zhibao1994

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 贱贱JMe at 2017-05-10 16:20:09
你确定是使用农杆菌感受态来做的吗,按照你的描述应该是DH5α的操作步骤。如果确定是农杆菌转化,步骤是不正确的,而且农杆菌的生长需要2-3天,过夜没有很正常。
农杆菌转化步骤:
1、 加1ug DNA于200ul感受态细胞 ...

搞错了,我做的就是DH5a感受态细胞。

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19楼2017-05-13 09:49:20
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Zhibao1994

新虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 预估预估 at 2017-05-12 23:08:07
我最近也在做哎!

我也是,又买了一批DH5a细胞,可是还是不成功,下午老师说他来亲自做下。

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20楼2017-05-13 09:50:56
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