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感受态效率太低了。试试超级感受态

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11楼2017-05-11 17:19:48

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Zhibao1994

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什么叫超级感受态？

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12楼2017-05-11 19:40:08

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海忆梦奇

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5楼: Originally posted by HZNU2013 at 2017-05-10 07:53:08
转化弄杆菌:冰置30分钟，37度1分钟液氮2分钟重复一次，冰置5分钟，加不含抗生素LB，30度摇3个小时，涂板，30度倒置培养过夜。

弱弱问一下，涂板前的摇菌不小心加上抗生素了，还能长菌吗？

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13楼2017-05-12 11:45:48

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Romanticman

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兄弟啊，你这么搞，老板不打你就不错了

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14楼2017-05-12 20:14:14

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Romanticman

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14楼: Originally posted by Romanticman at 2017-05-12 20:14:14
兄弟啊，你这么搞，老板不打你就不错了

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手快，点了，哈哈，可以参考一下

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15楼2017-05-12 20:17:36

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Romanticman

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13楼: Originally posted by 海忆梦奇 at 2017-05-12 11:45:48
弱弱问一下，涂板前的摇菌不小心加上抗生素了，还能长菌吗？...

转化后摇菌不加抗生素啊，难道你们城里人有新花样，哈哈

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16楼2017-05-12 20:20:49

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我最近也在做哎！

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17楼2017-05-12 23:08:07

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Zhibao1994

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14楼: Originally posted by Romanticman at 2017-05-12 20:14:14
兄弟啊，你这么搞，老板不打你就不错了

转化

为啥打我。就因为我把DH5a记成了农杆菌吗？表示之前一直以为做的是农杆菌，其实一直做的是大肠杆菌。农杆菌的感受态细胞还在冰箱里。

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18楼2017-05-13 09:48:07

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Zhibao1994

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7楼: Originally posted by 贱贱JMe at 2017-05-10 16:20:09
你确定是使用农杆菌感受态来做的吗，按照你的描述应该是DH5α的操作步骤。如果确定是农杆菌转化，步骤是不正确的，而且农杆菌的生长需要2-3天，过夜没有很正常。
农杆菌转化步骤：
1、加1ug DNA于200ul感受态细胞 ...

搞错了，我做的就是DH5a感受态细胞。

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19楼2017-05-13 09:49:20

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Zhibao1994

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17楼: Originally posted by 预估预估 at 2017-05-12 23:08:07
我最近也在做哎！

我也是，又买了一批DH5a细胞，可是还是不成功，下午老师说他来亲自做下。

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20楼2017-05-13 09:50:56

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