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饿的神啊新虫 (著名写手)
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全长P不出来怎么办,求指导 已有4人参与
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求哪位大侠给设计一对引物来扩增全长(3512bp),我已经做了2对引物了,都做了温度梯度,然而都没有任何条带 ACACGTACGTTGTGAGTTGTGACCACTACTTTCCCACAAAGAATTTTTTTTTTTTTTCCTAAAAATAAAAAAGATCTCATTTCTATAAGTTGTTTTAGTTTGATTTTACTTGCAGAAGAAAATTGAAGACATGGGAACTGAGGATCATCACCACCAGCATCATCATTCGGACACAGAGGTTCTTGGCAACGAGAGGATCCCGTACAGTGGTCCGCTAAGCGGCCCTTTGAACAAGAGAGTTGGCAGGAAGAGCACCAAGTTTAATTTGGCGACGGAATCAAGCTCAGGCTCGTCACCTCACGATGAGCCTTACGTTGAGATCACACTCGACGTCCGTGACGACTCGGTGGCTGTTCACAGCGTTAAGGCCGCTGGTGGGGATCATAGTAATCTTCAGGAAGATCCTGAGATTACTTTACTTGCAAAAGGGTTAGAGAAAAGGTCAACTTCTTTTGGTTCCAGTGTTGCTAGAACGGCTTCCGCGAAAATCAGGCAGGTGTCTCAAGAGCTCAAGCGCTTGGCTTCCTTTGCGAAGAAGCCTCAGCCGCCTGCCCGGTTTGATAGGAACAAGTCTGCTGCAGCTTATGCTTTGAAGGGGCTCAAGTTCATTAGCAAGACTGATGGTGGTGCTGGTTGGGCTAATGTTGAGAAGCGATTTGATGAAATAACCGCATCTACTAATGGGGTCTTGCCTCGAGCTCGCTTTGGCGAATGCATAGGAATGAACAAGGACTCGAAGGATTTCGCTGTTGAGTTGTTTGATGCTCTTACTCGGAGACGTAATATTCAAGGGGATACAATCACTAAGGATCAGCTAAGAGAGTTTTGGGATCAGATCTCTGATCAGAGTTTTGATTCCAGGCTTCAAACTTTCTTTGACATGGTTGATAAAGATGCAGATGGCAGAATCACGGAAGATGAAGTCAGAGAGATTATCACTCTCAGTGCTTCAGCAAACAAGCTCTCAAATATCCAGAAGCAAGCAGAGGAATATGCAGCTCTTATTATGGAAGAATTGGATCCTGACCATCTCGGATACATCATGATAGACAACCTGGAAATGCTTCTGTTACAAGCACCGGCGCAATCTGTTAAAGGTGGTGAGAGTCGAAACTTGAGCCACATGTTGAGCCAGAAGCTGAAGCCTACACAATTTGACAACCCAATTAGGAGATGCTGCGACAGCACCATGTACTTTTTACTGGACAATTGGCAAAGGGTGTGGGTGATGGCACAGTGGATTGGAGTGATGGCAGGGCTATTTACATACAAATACATTCAGTATAAAAACAGAGCTGCATTTGAAGTAATGGGACACTGCGTGTGCATGGCCAAAGGTGCTGCTGAGACGCTAAAATTCAACATGGCTCTGATTTTATTACCCGTCTGTCGAAACACCATTACATGGCTCAGAAACAAGACCAAACTCAGTGGTGTTGTTCCATTTGATGACAACCTCAATTTCCACAAGGTGATAGCAGTTGGAATCTCAATTGGGGTCGGAATACATGCTATTTCACATTTAGCATGCGATTTCCCTCGGCTTATAAATGCAAGTGAAGAGAAGTATGAGCCAATGGAGCCATATTTTGGGGATCAGCCCAAAAATTACTGGCATTTTGTGAAGTCAGTAGAAGGGGTAACTGGGATTGTGATGGTTGTTCTGATGGCTATCGCCTTCACACTTGCAACCCCATGGTTCCGGAGAAACAAGCTCAATTTGCCAAAGCCGTTAAAGAAGCTCACTGGGTTCAATGCCTTTTGGTATTCTCATCACCTTTTTGTCATCGTTTACACCCTGCTCATTGTGCATGGCCAATACCTTTACTTGACCAAAAAATGGTACAAGAAGACGACATGGATGTACTTGGCAATTCCAATTTGTCTTTATGCCACTGAGCGGTTGATTAGGGCACTGAGGTCAAGCATTAAGGCAGTTTCCATACAAAAGGTGGCTGTTTATCCTGGAAATGTGCTGGCTCTTCACATGTCAAAGCCAGATAGATTCAGATACAAGAGTGGGCAGTACATGTTTGTCAATTGTGCTGCTGTGTCCCCATTCGAATGGCACCCATTTTCAATAACTTCTGCCCCGGATGATGACTACCTCAGTGTTCACATTAGAACTCTTGGTGACTGGACTCGTCAACTCAGAACAGTTTTCTCAGAGGTATGCCGACCACCTCCAAACGGAATAAGTGGACTCCTCCGAGCCGAGGGACATAACAATCCTGATTTTCCTAGAGTTTTGATTGACGGTCCATATGGAGCTCCAGCACAAGACTACAAAGAGTATGAGGTGGTTTTATTAGTTGGTCTGGGAATTGGAGCAACTCCGATGATCAGCATTGTTAAAGACATAGTGAACAACATGAAAGCCATAGAGGAAGAAGAAGAAAATGATTTAGAAAACGGTCGTGACACCGGCGTTAACACAACATCATCATCATCGACAACAACCACGAGCCCTTCTTCTTCTGGACACAGAAGAAGGGACCAATTCAGGACAAGAAGAGCATACTTCTATTGGGTTACAAGAGAGCAAGGCTCGTTCGATTGGTTTAAGGGAGTGATGAATGAGGTGGCTGAATTGGACCACAACAATGTCATAGAGCTTCACAATTACTGCACCAGTGTTTATGAAGAAGGTGATGCTCGCTCAGCTCTCATTGCCATGCTTCAGTCCCTCAATCACGCCAAGAATGGCGTTGACGTTGTCTCTGGAACACGCGTTAAGTCACATTTCGCCAAGCCTAATTGGCGCAATGTGTACAAACGCGTTGCTCTCAATCACCCTGATTCTAGAGTTGGTGTTTTCTATTGCGGGGCACCGGCACTGACAAAAGAGCTACGACACCTAGCTTTGGATTTCTCTCACAAGACAAGCACCAAGTTTGATTTCCATAAAGAAAACTTCTAGATCAAGTCCCTCCTGATTTCCACCATTATATATCATCTCTTCCACTCCGTTTTCTCGTACAAAGCCTGTGGCATGGCCCACTGGCCCTTATGTTTATAGAAAAATCATATCAATATTTGTTTGGTACCCAGTTGATTTTGCTGCAAAATCACTAATAGAGAGCATTAGAAATATCAAGCGGACAAAGGTTGGTGGGTAGTTGATATCAAGGCCACACCACACTGGACACACAACACATGGCAAGGGAGATATAGGCCGAAAAAGGGGTTTAGCAAAAAAGTCATGCTCAGCCATTTCCTTTTGTTAAAAGTTGTGGTCCAAGCCAATAATTTTGTGAGAAATAGTAATAATGGCAGCCTGGCAGCCACCACTAATAATGGCAGCCTGGCAGCCACCACCAACTCAGTCCTTAACAGCCAAATGTAAAAGGGTTTTTGTTTTGTTTTCTTTTCTTTTTGGTTGGAGTAATTTGTTGTTTTATTTGATTAATTAAAGTTGCGATGTCAATTGAATGGGGTCGTAAGCCCTTTAAAATGTAAGTATGTATTGAATAATTAGTTCGGAGTACACTTTACCCAATTTCTTATGTTTC 这是我之前的引物 F1:ACACGTACGTTGTGA R1:GAAACATAAGAAATTGGG F2:ACACGTACGTTGTGAGTTGTGACCACTACTTTCCCACAAA R2:GAAACATAAGAAATTGGGTAAAGTGTACTCCGAACTAATT |
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2楼2017-05-05 22:21:49
匿名
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小志
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3楼2017-05-05 23:16:55
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7楼2017-05-06 11:55:38
饿的神啊
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9楼2017-05-07 15:12:24
aaa0001984
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换phusion polymerase之类具有长片段扩增能力的酶,普通的taq之类没这能力。而且你的PCR体系也要注意扩增时间,别还在合成片段呢,温度就开始95度进行下一个循环了 发自小木虫Android客户端 |
10楼2017-05-07 15:46:11












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