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饿的神啊新虫 (著名写手)
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如何加Flag、HA标签
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小白想要做蛋白互作，制备单克隆抗体很麻烦，所以想通过给PCR给目的片段加一个通用标签（比如Flag），然后用该标签对应的商品化的抗体（anti-Flag）来做杂交。那么，该如何给我的目的序列加标签呢？看到很多的Flag标签都加在5端，并且加了kozak序列，那么请问顺序是怎么样的呢？ 若想在5端加Flag标签，是否是“保护碱基+酶切位点+GCCACCATG+Flag序列+目的基因CDS序列（上游引物）”，CDS序列的ATG还保留吗，移码突变怎么查看呢； 若想在3端加HA序列，是否是 “下游引物+HA序列+酶切位点+保护碱基”，CDS部分的终止子应该被删掉，加在HA序列后，那具体怎么操作啊？ |
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stevenshi021
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