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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取质量
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meng蓝色桃子

新虫 (初入文坛)
1.RNA浓度不同和你每管的上样量有很大关系。   2.你的RNA有降解并且有5s带，建议用trizol一直这种结果的话可以换用试剂盒提。  3.用于qPCR的RNA要求跟你逆转录所用的试剂盒有关，我逆转录试剂盒要求RNA用量1ug，所以我的浓度范围要在170-700之间。

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11楼2017-05-03 23:54:01
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宁文峰

新虫 (小有名气)
能测浓度最好，通过吸光度比值看纯度，，测不了浓度就跑胶看，首先3条带清晰没有明显拖尾表明纯度还可以，takara marke上杨7v（好像是，可以再查一下）750的带大约亮度对应为100ng/v，可以估算rna浓度。建议提取后直接反转录后上荧光，这样可以排除某些基因降解速率差异问题，批次间可以trizol-80冻存，一起提，，相对定量只要反转录后能批出内参就好，对rna量没有太多要求。只要别太高就好。

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所追求的不在明天，而在现在以前
12楼2017-05-04 13:19:13
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LIFERESET

新虫 (初入文坛)
trizol法提RNA最好有个匀浆仪，这样能避免研磨时的降解损失
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13楼2017-05-05 14:47:33
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ufolt16

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by LIFERESET at 2017-05-05 14:47:33
trizol法提RNA最好有个匀浆仪，这样能避免研磨时的降解损失

你好，匀桨仪的话手持的那种可以吗，是把叶片剪碎收集到ep管里，然后扔液氮里速冻拿出来加trizol然后匀浆吗？请问具体是这样操作吗

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14楼2017-05-08 14:20:59
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ufolt16

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 宁文峰 at 2017-05-04 13:19:13
能测浓度最好，通过吸光度比值看纯度，，测不了浓度就跑胶看，首先3条带清晰没有明显拖尾表明纯度还可以，takara marke上杨7v（好像是，可以再查一下）750的带大约亮度对应为100ng/v，可以估算rna浓度。建议提取后直 ...

你好，trizol冻存是不是说研磨成粉后收集到管里然后加trizol后低温冻存，然后等所有样品取到后一起进行后面的步骤？

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15楼2017-05-08 14:22:36
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