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zhangmeiqiji银虫 (初入文坛)
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[求助]
人源蛋白质在细菌内不能表达，求解
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| 我的蛋白是人源蛋白，克隆在pET-28a载体上，在BL21里表达的很好，但是后来需要换到pBAD载体上，得用DH10B表达，结果就表达不出来了，我确定克隆是没问题的，序列都对，现在就怀疑是因为DH10B的蛋白酶基因没有被敲掉，所以我的蛋白被降解掉了，想问问有没有相关经验的高手，这样可以怎么解决呢？可不可以在诱导表达的时候加蛋白酶抑制剂啊？或者要加个信号肽给拉到胞间质表达吗？我的蛋白还是需要一定表达量的，担心胞间质表达量会很低啊？求高手解答，不胜感激~谢谢 |
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