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zhangmeiqiji银虫 (初入文坛)
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人源蛋白质在细菌内不能表达,求解
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| 我的蛋白是人源蛋白,克隆在pET-28a载体上,在BL21里表达的很好,但是后来需要换到pBAD载体上,得用DH10B表达,结果就表达不出来了,我确定克隆是没问题的,序列都对,现在就怀疑是因为DH10B的蛋白酶基因没有被敲掉,所以我的蛋白被降解掉了,想问问有没有相关经验的高手,这样可以怎么解决呢?可不可以在诱导表达的时候加蛋白酶抑制剂啊?或者要加个信号肽给拉到胞间质表达吗?我的蛋白还是需要一定表达量的,担心胞间质表达量会很低啊?求高手解答,不胜感激~谢谢 |
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