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雪上一支蒿_2008

银虫 (小有名气)

[交流] 求助:分离换梯度?

做分离的时候,怎么摸条件呀?然后怎么换梯度啊?一个梯度冲到什么时候就可以换梯度呢?
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lqqm

银虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指教!
首先是分析文献,找到几个影响分离效果的主要因素

再者是预试验,筛选出每个因素相对较好的状态,确定你自己的流程

筛选过程中大量的TLC检测,得到较合适的洗脱剂比例,换梯度的时候,把柱上端前一个梯度的洗脱剂放至基本无液面时,直接加入下一个梯度的洗脱剂即可

冲的过程中还是要贯穿着TLC,洗脱液薄层检测无斑点时或者你的目标成分斑点消失时,就可以换下一个梯度
2楼2009-01-05 20:42:44
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哈药学者

银虫 (小有名气)

摸条件很麻烦需要你不断尝试的,我建议你看看分析化学,就会很快了解了。。配比溶剂时可以选择柱子的不通和极性的不通用正相或反相来分。我建议用SEPDEXLH-20或ODS柱子,
3楼2009-01-05 21:29:29
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wangp0202


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
老兄,你怎么跑起柱子了,
     先用薄层板,找到合适的展开剂,在减小展开剂的洗脱能力,具体减小的程度可以查《天然药物化学》,然后用此流动相做预试验,看看分离效果(用TLC检测),
再调整流动相比例。
4楼2009-01-05 22:02:00
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yanwenqiang

新虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
先弄清楚柱子
欲分离的成分和洗脱剂
在按一定的比例按极性由小到大的洗脱,用TCL检测,也不难啊
就是很麻烦
需要的过程很多
只有你自己做了才知道
5楼2009-01-15 21:13:32
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xieshian

新虫 (小有名气)

TCL贯穿始终啊  依据极性来跑板  依斑点来看洗脱情况
6楼2009-01-19 22:34:11
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匿名

用户注销 (文坛精英)



karl2100(金币+1):多谢指教! 1-23 16:12
本帖仅楼主可见
7楼2009-01-23 07:43:46
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