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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 求助：分离换梯度？
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雪上一支蒿_2008

银虫 (小有名气)

[交流] 求助：分离换梯度？

做分离的时候，怎么摸条件呀？然后怎么换梯度啊？一个梯度冲到什么时候就可以换梯度呢？
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1楼 2009-01-05 18:36:04
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lqqm

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指教！
首先是分析文献，找到几个影响分离效果的主要因素

再者是预试验，筛选出每个因素相对较好的状态，确定你自己的流程

筛选过程中大量的TLC检测，得到较合适的洗脱剂比例，换梯度的时候，把柱上端前一个梯度的洗脱剂放至基本无液面时，直接加入下一个梯度的洗脱剂即可

冲的过程中还是要贯穿着TLC，洗脱液薄层检测无斑点时或者你的目标成分斑点消失时，就可以换下一个梯度
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2楼2009-01-05 20:42:44
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哈药学者

银虫 (小有名气)
摸条件很麻烦需要你不断尝试的，我建议你看看分析化学，就会很快了解了。。配比溶剂时可以选择柱子的不通和极性的不通用正相或反相来分。我建议用SEPDEXLH-20或ODS柱子，
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3楼2009-01-05 21:29:29
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wangp0202

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
老兄，你怎么跑起柱子了，
     先用薄层板，找到合适的展开剂，在减小展开剂的洗脱能力，具体减小的程度可以查《天然药物化学》，然后用此流动相做预试验，看看分离效果（用TLC检测），
再调整流动相比例。
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4楼2009-01-05 22:02:00
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yanwenqiang

新虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
先弄清楚柱子
欲分离的成分和洗脱剂
在按一定的比例按极性由小到大的洗脱，用TCL检测，也不难啊
就是很麻烦
需要的过程很多
只有你自己做了才知道
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5楼2009-01-15 21:13:32
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xieshian

新虫 (小有名气)
TCL贯穿始终啊  依据极性来跑板  依斑点来看洗脱情况
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6楼2009-01-19 22:34:11
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匿名

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★
karl2100(金币+1):多谢指教！ 1-23 16:12
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7楼2009-01-23 07:43:46
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