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雪上一支蒿_2008

银虫 (小有名气)

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专业: 药物分析

[交流] 求助：分离换梯度？

做分离的时候，怎么摸条件呀？然后怎么换梯度啊？一个梯度冲到什么时候就可以换梯度呢？

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1楼 2009-01-05 18:36:04

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wangp0202

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虫号: 542110

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~

老兄，你怎么跑起柱子了，
先用薄层板，找到合适的展开剂，在减小展开剂的洗脱能力，具体减小的程度可以查《天然药物化学》，然后用此流动相做预试验，看看分离效果（用TLC检测），
再调整流动相比例。

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4楼2009-01-05 22:02:00

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lqqm

银虫 (小有名气)

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专业: 临床药理

★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指教！

首先是分析文献，找到几个影响分离效果的主要因素

再者是预试验，筛选出每个因素相对较好的状态，确定你自己的流程

筛选过程中大量的TLC检测，得到较合适的洗脱剂比例，换梯度的时候，把柱上端前一个梯度的洗脱剂放至基本无液面时，直接加入下一个梯度的洗脱剂即可

冲的过程中还是要贯穿着TLC，洗脱液薄层检测无斑点时或者你的目标成分斑点消失时，就可以换下一个梯度

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2楼2009-01-05 20:42:44

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