24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (5076)
>文献求助 (385)
>论文投稿 (350)
>导师招生 (338)
>博后之家 (267)
>虫友互识 (254)
>考博 (127)
>硕博家园 (112)
>学术会议 (108)
>有机交流 (91)
>招聘信息布告栏 (86)
>基金申请 (48)
>休闲灌水 (39)
>教师之家 (35)
>考研 (31)
>找工作 (29)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

哈哈11111111

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 272.6
帖子: 17
在线: 6.8小时
虫号: 5304082
注册: 2016-12-01
性别: MM
专业: 作物分子育种

[求助] KOD酶扩增很多杂带已有1人参与

用的是51-59的温度梯度一种DNA，marker是2k的，目的条带在1600bp，做了很多次总是有三条带，求大神指导啊

发自小木虫Android客户端

回复此楼

» 猜你喜欢

AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点已经有0人回复
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有134人回复
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？已经有0人回复
His标签蛋白纯化怎么才能快？已经有0人回复
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析已经有0人回复
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用已经有0人回复
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点已经有0人回复
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复

1楼 2017-04-25 10:36:47

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zhoubin0823

木虫 (小有名气)

应助: 8 (幼儿园)
金币: 3771.7
散金: 30
红花: 2
帖子: 223
在线: 230.1小时
虫号: 1421944
注册: 2011-09-29
性别: MM
专业: 蛋白质组学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

1、优化pcr条件，比如更高的退火温度，不过大多数情况下无用。
2、这种情况，一般问题出在引物上，重新设计引物，引物好自然条带单一。
3、最想推荐的方法，看胶上还是有1600bp的条带，割胶回收，取回收产物再pcr，可以肯定再次p，条带单一。KOD酶保真性非常好，p过几次2500bp无突变，用它pcr两次引入突变的概率不大。