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Wendymia新虫 (初入文坛)
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[求助]
【求助】ISSR-PCR用的takara的ex酶优化体系，扩成这样是体系浓度太高了么
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PCR新手一枚，最近在做ISSR体系优化。跑成这样是体系浓度过高的原因吗？引物是国际通用引物， 引物序列：TCTCTCTCTCTCTCTCGT， Taq，2U, dNTPs mix(2.5mM),2.5ul Mg2+(25mM),1.0/1.5/2.0/2.5ul 引物(12.5uM),1.0/2.0/3.0/4.0ul DNA5ng PCR程序 PCR程序优化 预变性 94/3min 变性 94/1min 退火 45 延伸 72/2min 循环 35 延伸 72/10min Taq酶购自Takara公司的， 顺便想问一下，在过程中有时候跑得出条带，有时候又跑不出基本都涉及哪些原因？ 求大神解答，感激不尽   发自小木虫IOS客户端 |
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