应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » HT115(DE3)菌表达dsRNA不成功！！
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 4161  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

chj8558

新虫 (小有名气)

[求助] HT115(DE3)菌表达dsRNA不成功！！ 已有2人参与

我挑取HT115（DE3）（重组L4440）单克隆于LB液体培养基，37℃ 200r 振荡培养16h后。按1：100稀释，扩大培养至OD=0.4时，加IPTG（终浓度1mM）诱导4h，然后提取dsRNA。但是我做了几次就是没有表达出dsRNA，为什么呢？？？求指教！！！@biostar2009
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-04-19 21:56:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

偶尔小情调

新虫 (初入文坛)
请问你的问题解决了吗？
赞一下 回复此楼
7楼2021-08-01 10:40:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

chj8558

新虫 (小有名气)
这是HT115（DE3）RNA电泳图谱。2和6是IPTG诱导后提取的RNA经DNase I和RNase A消化后的情况，3、4和7、8诱导后没有用酶消化的，5和9是没有诱导的。我的目的dsRNA大小比600bp一些。从3、4和7、8看好像诱导出来了，可是为什么经过酶消化就没有条带了哪？？！！！   小弟刚开始做RNAi，请教各位大神，望不吝赐教！！！
HT115(DE3)菌表达dsRNA不成功！！
诱导HT115菌表达dsRNA检测.jpg
赞一下 回复此楼
3楼2017-04-23 21:53:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rikku1518

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chj8558 at 2017-04-23 21:53:53
这是HT115（DE3）RNA电泳图谱。2和6是IPTG诱导后提取的RNA经DNase I和RNase A消化后的情况，3、4和7、8诱导后没有用酶消化的，5和9是没有诱导的。我的目的dsRNA大小比600bp一些。从3、4和7、8看好像诱导出来了，可是 ...

请问楼主最后找到原因了吗？
赞一下 回复此楼
4楼2018-07-23 15:17:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西区五号楼

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by rikku1518 at 2018-07-23 15:17:21
请问楼主最后找到原因了吗？...

你好，我最近打算做昆虫的RNA干扰，想用大肠杆菌表达。但是在看文献的过程中，看到了表达载体是pET-2p，文献中说是由pET-30（a）+改造得来的，查了好多也没有看到具体的改造方法；还有用到的感受态是HT115菌株（RNA酶III缺失的BL21），这个感受态是可以购买吗？可以交流一下吗？
赞一下 回复此楼
5楼2018-10-25 10:06:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程085601，270求调剂 +42 @ASDF1234 2026-04-08 46/2300 2026-04-14 18:12 by 逍遥三郎
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 6/300 2026-04-14 16:40 by zhouxiaoyu
[考研] 复试调剂 +18 积极向上； 2026-04-10 20/1000 2026-04-14 16:11 by zs92450
[考研] 各位老师好，求调剂，本科211，一志愿天津大学生物与医药学硕，差两名录取。 +11 路六六jjj 2026-04-13 11/550 2026-04-14 16:01 by zs92450
[考研] 071000生物学调剂求助 +18 zzzzwww 2026-04-09 21/1050 2026-04-14 15:39 by zs92450
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 305求调剂 +8 玛卡巴卡boom 2026-04-11 8/400 2026-04-14 09:04 by pengliang8036
[考研] 22专硕求调剂 +8 haoyun上岸 2026-04-11 10/500 2026-04-13 22:15 by zhq0425
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 322求调剂，08工科 +4 今天是个小号 2026-04-08 4/200 2026-04-13 00:20 by baobaoye
[考研] 0831一轮调剂失败求助 +10 小熊睿睿_s 2026-04-11 10/500 2026-04-12 22:43 by 长弓傲
[考研] 化工调剂求导师收留！一志愿失利，踏实肯干，有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 电子信息279求调剂，有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 283求调剂 +22 那个噜子 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 10:41 by 逆水乘风
[考研] 一志愿矿大，材料工程专硕314分，0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 一志愿中科大070300化学，314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550， 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭