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upwardkl

新虫 (初入文坛)

[求助] 诱导表达的蛋白主要在包涵体中,已带有GST标签,求助分离纯化的操作方法? 已有1人参与

求助:
诱导原核表达,进行SDS-PAGE检测,主要以包涵体的形式出现,查询得知有超滤、透析等方法,但不知道具体该如何操作?
购买了一个GST分离纯化的试剂盒,,,但说明书为英文版,,看得似懂非懂,,,不知如何下手?

望高手指点,谢谢你们!
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雪霁花开,向上追求
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cxw123

新虫 (正式写手)

超滤和透析都是后续工作,你首要任务让蛋白可溶,GST本来是为了让蛋白可溶的,要是加了GST还是包涵体,可以考虑更换培养基,用TB培养基可以提高可溶性,降低诱导剂浓度和诱导温度,可以拿到可溶的蛋白,不推荐进行包涵体复性,GST融合蛋白蛋白复性不成功不会挂柱,后续纯化仍然很麻烦

发自小木虫Android客户端
7楼2017-04-19 22:38:52
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蓝蓝0921

铁杆木虫 (职业作家)

古怪
2楼2017-04-18 21:47:06
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Wawa521

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2017-04-18 21:48:58
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Hjqilu

新虫 (初入文坛)

4楼2017-04-19 00:16:24
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