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微生物SEM 已有2人参与
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| 有没有人做过SEM.不知能否给点意见，是这样的，我一直在做SEM，但是每次结果都不怎么好，每次都会出现菌体结团或被淹没，我的方法基本上现将菌体离心，在用超纯水清洗培养基等，在加入2.5%的戊二醛磷酸缓冲液进行固定2-4个小时，在用超纯水清洗里面的盐类物质几次，在用乙醇梯度脱水，最后用叔丁醇置换脱水，再干燥。但是每次拍出的样品菌体基本上是埋没在其中，并不分散，不知道大家能否愿意分享相关经验 |
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2017-04-15 17:25:18, 1.27 M
2017-04-15 17:26:15, 1.27 M
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2楼2017-05-05 10:24:46
gc1016670506
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【答案】应助回帖
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| 收集对数生长期的新鲜菌液，无菌水洗涤3次，置于2.5%戊二醛磷酸缓冲液（pH7.2）中，于4℃固定过夜；次日以0.15%的同一缓冲液冲洗；然后依次用40%、70%、90%和100%的乙醇分别脱水15 min；脱水后用醋酸戊脂置换乙醇；将上述样品于真空冷冻干燥机中干燥 |
3楼2017-05-05 16:03:17
gc1016670506
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在外面也应该是清晰的菌体啊 5楼2017-05-06 21:12:55
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陈年韶光
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