24小时热门版块排行榜    

查看: 2202  |  回复: 6

安格洛

新虫 (初入文坛)

[求助] 微生物SEM 已有2人参与

有没有人做过SEM.不知能否给点意见,是这样的,我一直在做SEM,但是每次结果都不怎么好,每次都会出现菌体结团或被淹没,我的方法基本上现将菌体离心,在用超纯水清洗培养基等,在加入2.5%的戊二醛磷酸缓冲液进行固定2-4个小时,在用超纯水清洗里面的盐类物质几次,在用乙醇梯度脱水,最后用叔丁醇置换脱水,再干燥。但是每次拍出的样品菌体基本上是埋没在其中,并不分散,不知道大家能否愿意分享相关经验
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 5-3.tif
  • 2017-04-15 17:25:18, 1.27 M
  • 附件 2 : 9-1.tif
  • 2017-04-15 17:26:15, 1.27 M

» 猜你喜欢

人生最重要的不是你现在所处的位置,而是所朝的方向
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郑丽君-CC

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
安格洛: 金币+1 2017-07-24 11:01:52
安格洛: 金币+1 2017-07-24 11:05:18
楼主是不是固定的时间太短了,而且离心完了他们不也就是堆积在一起了吗?
2楼2017-05-05 10:24:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gc1016670506

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
安格洛: 金币+5, 有帮助 2017-05-06 21:13:46
小冀-: 应助指数+1, 鼓励回帖交流 2017-05-07 09:29:26
安格洛: 金币+2 2017-07-24 11:02:21
安格洛: 金币+5, 方法和我差不多,至少说明我没有偏离很远,可能是细节出了差错 2017-07-24 11:06:33
安格洛: 金币+9, 有帮助, 之前不知道怎么赏金币,抱歉了,真的很谢谢你的热心回复,科研路上不容易 2017-07-24 11:15:42
收集对数生长期的新鲜菌液,无菌水洗涤3次,置于2.5%戊二醛磷酸缓冲液(pH7.2)中,于4℃固定过夜;次日以0.15%的同一缓冲液冲洗;然后依次用40%、70%、90%和100%的乙醇分别脱水15 min;脱水后用醋酸戊脂置换乙醇;将上述样品于真空冷冻干燥机中干燥
3楼2017-05-05 16:03:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gc1016670506

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
安格洛: 金币+1 2017-07-24 11:02:39
安格洛: 金币+1, 没有尝试,不过谢谢你的建议 2017-07-24 11:07:09
醋酸戊脂可换成叔丁醇,菌体被埋起来也有可能是上镜前镀金过厚的影响。
4楼2017-05-05 16:04:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安格洛

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 郑丽君-CC at 2017-05-05 10:24:46
楼主是不是固定的时间太短了,而且离心完了他们不也就是堆积在一起了吗?

可是不离心又怎么脱水呢,就算堆积,也只是里面的看不到啊,在外面也应该是清晰的菌体啊
人生最重要的不是你现在所处的位置,而是所朝的方向
5楼2017-05-06 21:12:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

懒懒呢

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gc1016670506 at 2017-05-05 16:03:17
收集对数生长期的新鲜菌液,无菌水洗涤3次,置于2.5%戊二醛磷酸缓冲液(pH7.2)中,于4℃固定过夜;次日以0.15%的同一缓冲液冲洗;然后依次用40%、70%、90%和100%的乙醇分别脱水15 min;脱水后用醋酸戊脂置换乙醇; ...

楼主 分别脱水的步骤是?离心再加入?
6楼2017-07-19 11:13:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈年韶光

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gc1016670506 at 2017-05-05 16:03:17
收集对数生长期的新鲜菌液,无菌水洗涤3次,置于2.5%戊二醛磷酸缓冲液(pH7.2)中,于4℃固定过夜;次日以0.15%的同一缓冲液冲洗;然后依次用40%、70%、90%和100%的乙醇分别脱水15 min;脱水后用醋酸戊脂置换乙醇; ...

请问乙醇脱水的步骤是什么呀

发自小木虫Android客户端
7楼2019-12-06 21:55:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 安格洛 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:51 by LH5NkK5Ud4bh
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-16 05:03 by LH5NkK5Ud4bh
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-16 04:23 by DgNGHc3h5tPl
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-16 04:11 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-16 03:38 by DgNGHc3h5tPl
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 03:35 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:50 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-16 02:35 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +6 两三岁ss 2026-09-14 6/300 2026-09-15 20:17 by 只吃肉葡萄
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:15 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 14:34 by VMDqgnlKimtZ
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:22 by VMDqgnlKimtZ
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 09:38 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:58 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:25 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[基金申请] 求教各位大神:2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀? +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
信息提示
请填处理意见