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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 【求助】Ni亲和层析 杂蛋白与目的蛋白一同被洗脱
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ffymd

新虫 (初入文坛)
我感觉可以先超滤以后再过ni柱
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21楼2017-04-20 12:12:44
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lff20126206

新虫 (小有名气)
引用回帖:
20楼: Originally posted by 酶学相关 at 2017-04-16 16:27:47
为什么不先预处理除杂蛋白，再做酸碱处理除杂蛋白，再做浓缩除杂蛋白提高浓度，再过离交树脂？？

专业大神你好！我的蛋白是个酶，看到你的昵称让我眼前一亮！你的专业也让我眼前一亮！
请问你是指怎么预先处理杂蛋白呢？怎么做酸碱处理呢（我已试过通过改变PH来改善亲和层析，发现杂蛋白依然伴随着我的蛋白下来）？
是不是有相关的试剂盒可以购买呀？可否推荐一下呢？
恳请大神赐教啊！
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22楼2017-04-20 13:31:28
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lff20126206

新虫 (小有名气)
引用回帖:
21楼: Originally posted by ffymd at 2017-04-20 12:12:44
我感觉可以先超滤以后再过ni柱

这个我考虑过，but还没尝试，请问我这么大的蛋白（120KD）选择多大孔径的过滤器呢？
多谢大神指导！
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23楼2017-04-20 13:34:26
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