| 查看: 2560 | 回复: 22 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
lff20126206新虫 (小有名气)
|
[求助]
【求助】Ni亲和层析 杂蛋白与目的蛋白一同被洗脱 已有2人参与
|
|
|
如题，用BL21表达蛋白，大小120KD，预测等电点为5.68。（PS：我扫描胶的效果不好，但能说明问题就行了） 细胞破碎液过镍柱后洗杂蛋白，并用含咪唑（50,100,150, 200, 300, 500mM）的咪唑洗脱液洗脱，总是有杂蛋白在洗脱液里。图中beas就是镍柱，表明我的蛋白是挂在镍柱上了。（PS：不知道为什么，诱导前后看不到我的目的蛋白表达量升高，之前小量诱导的时候，确定该蛋白能被诱导。） 尝试了用500mMNaCl洗脱（不含咪唑）杂蛋白，发洗脱中的杂带并未改善。 请教各位大侠，有什么办法可以解决这个问题？  图片1.png@gyesang@hc-material |
回复此楼» 猜你喜欢
体制内长辈说体制内绝大部分一辈子在底层，如同你们一样大部分普通教师忙且收入低
已经有10人回复
-
过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链
已经有9人回复
-
今年春晚有几个节目很不错，点赞！
已经有10人回复
-
情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？
已经有10人回复
-
基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书
已经有5人回复
绝对零度的笑
木虫 (正式写手)
- 应助: 41 (小学生)
- 金币: 3155.8
- 散金: 26
- 红花: 6
- 帖子: 899
- 在线: 95.8小时
- 虫号: 245021
- 注册: 2006-04-22
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
9楼2017-04-14 08:08:50
lff20126206
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 238.5
- 散金: 5
- 帖子: 113
- 在线: 36.5小时
- 虫号: 3493364
- 注册: 2014-10-23
- 专业: 植物遗传学
2楼2017-04-13 14:45:10
lff20126206
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 238.5
- 散金: 5
- 帖子: 113
- 在线: 36.5小时
- 虫号: 3493364
- 注册: 2014-10-23
- 专业: 植物遗传学
3楼2017-04-13 17:15:59
 本帖仅楼主可见 |
5楼2017-04-13 17:36:34