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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » pET30a转化
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wanygaoyao

新虫 (初入文坛)

[求助] pET30a转化 已有1人参与

我用pET30a作为载体，表达菌种用的是X L1blue 卡那霉素是50ug/ml 但是涂完平板后就一直长糊，完全挑不出单克隆，请问大家是什么原因 急 我已经重新换过抗生素

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1楼 2017-04-09 23:47:50
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wanygaoyao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 绝对零度的笑 at 2017-04-10 07:14:27
你要是做转化用的是抽提好的质粒的话，长糊是肯定的。感受态那么高的转化效率，不长糊才说明你的感受态或者质粒有问题。如果确定抗生素没问题，转化后的菌液多做几个稀释度，多涂几块板子，总会有单克隆的

我连接的体系载体只加了1ul 浓度是38ng/ul的

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3楼2017-04-10 08:40:17
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绝对零度的笑

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你要是做转化用的是抽提好的质粒的话，长糊是肯定的。感受态那么高的转化效率，不长糊才说明你的感受态或者质粒有问题。如果确定抗生素没问题，转化后的菌液多做几个稀释度，多涂几块板子，总会有单克隆的
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2楼2017-04-10 07:14:27
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