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wanygaoyao

新虫 (初入文坛)

[求助] pET30a转化 已有1人参与

我用pET30a作为载体,表达菌种用的是X L1blue 卡那霉素是50ug/ml 但是涂完平板后就一直长糊,完全挑不出单克隆,请问大家是什么原因 急 我已经重新换过抗生素

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绝对零度的笑

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你要是做转化用的是抽提好的质粒的话,长糊是肯定的。感受态那么高的转化效率,不长糊才说明你的感受态或者质粒有问题。如果确定抗生素没问题,转化后的菌液多做几个稀释度,多涂几块板子,总会有单克隆的
2楼2017-04-10 07:14:27
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wanygaoyao

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 绝对零度的笑 at 2017-04-10 07:14:27
你要是做转化用的是抽提好的质粒的话,长糊是肯定的。感受态那么高的转化效率,不长糊才说明你的感受态或者质粒有问题。如果确定抗生素没问题,转化后的菌液多做几个稀释度,多涂几块板子,总会有单克隆的

我连接的体系载体只加了1ul 浓度是38ng/ul的

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3楼2017-04-10 08:40:17
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