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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR获取目的片段
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旋转的律动

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR获取目的片段

以5.9kb质粒为模板，用含酶切位点的引物p1.2kb目的片段，为什么会有一条质粒的条带？
注：marker为5000
目的条带为2.3条带

PCR获取目的片段


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1楼 2017-04-06 23:16:38
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旋转的律动

新虫 (初入文坛)
写错了，是以构建好的5kb的质粒为模板

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2楼2017-04-07 07:43:36
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王希庆

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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旋转的律动
3楼2017-04-07 07:52:56
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旋转的律动

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 王希庆 at 2017-04-07 07:52:56
应该是你质粒模版浓度高，有条带很正常

那能不能割胶回收，会不会有影响
因为这个模板质粒和我构建的质粒抗性一样，如果模板质粒转入感受态的话，没办法和表达载体分开来

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4楼2017-04-07 08:54:39
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卡维斯

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用质粒当模板加多了就会有质粒条带，由于质粒比较好扩增，可以把质粒稀释十倍再用。
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旋转的律动
5楼2017-04-07 22:27:11
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旋转的律动

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 卡维斯 at 2017-04-07 22:27:11
用质粒当模板加多了就会有质粒条带，由于质粒比较好扩增，可以把质粒稀释十倍再用。

谢谢！

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6楼2017-04-15 15:05:52
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Artemis茗

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该是模板浓度过高吧

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7楼2017-04-15 16:49:09
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