24小时热门版块排行榜    

查看: 2992  |  回复: 6

五点五

新虫 (初入文坛)

[求助] 实验告急,,,用Hela细胞进行转染,效率低怎么回事!求大神指点! 已有1人参与

1.用PEI药转,质粒上连接的目的基因相对较大,有GFP可以看荧光,但是空质粒也看不到荧光。
2.老师不想用lip2000,有些贵!
3.目前hela细胞长的也比较慢,但是形态还可以,我认为血清不好导致的。想问问换一个好血清会提高转染效率吗?
4.转了好久了,都不行,但是293T转的非常好,可以看到一片荧光。
求大神指点,感激不尽!

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科研用户

禁言 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

2楼2017-04-11 13:41:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cruiser肖

金虫 (正式写手)

3楼2017-04-13 07:23:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cruiser肖

金虫 (正式写手)

照理说hela很好转,可以用好的转染试剂做个对照看看是不是pei问题

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-04-13 07:24:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西湖鸟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果觉得lipo2000贵,可以用RFect小核酸转染试剂,我现在就是用的这个试剂,价格便宜,做Hela细胞的siRNA转染做到90%以上,48hqPCR检测的,没看荧光,荧光不准的。
5楼2018-10-16 13:14:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西湖鸟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果觉得lipo2000贵,可以用RFect小核酸转染试剂,我现在就是用的这个试剂,价格便宜,做Hela细胞的siRNA转染做到90%以上,48hqPCR检测的,没看荧光,荧光不准的。
6楼2018-10-17 14:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

别踩我的菜

新虫 (小有名气)

楼主可以看看siRNA设置梯度了吗?最好用带荧光的siRNA对照转转看是否转进去了,需要用专用转染试剂才可以,朋友给我推荐了RFect悬浮细胞专用小核酸转染试剂,我用在Hela细胞上做到70%的转染效率,可能条件需要在优化一下就更好了。
7楼2019-03-27 15:14:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 五点五 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 6/300 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +6 启萌科技 2026-08-12 21/1050 2026-08-14 19:48 by 启萌科技
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见