应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 实验告急，，，用Hela细胞进行转染，效率低怎么回事！求大神指点！
71/1返回列表
查看: 2738  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

五点五

新虫 (初入文坛)

[求助] 实验告急，，，用Hela细胞进行转染，效率低怎么回事！求大神指点！ 已有1人参与

1.用PEI药转，质粒上连接的目的基因相对较大，有GFP可以看荧光，但是空质粒也看不到荧光。
2.老师不想用lip2000，有些贵！
3.目前hela细胞长的也比较慢，但是形态还可以，我认为血清不好导致的。想问问换一个好血清会提高转染效率吗？
4.转了好久了，都不行，但是293T转的非常好，可以看到一片荧光。
求大神指点，感激不尽！

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-04-06 20:38:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科研用户

禁言 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
2楼2017-04-11 13:41:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cruiser肖

金虫 (正式写手)
照理说

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
3楼2017-04-13 07:23:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cruiser肖

金虫 (正式写手)
照理说hela很好转，可以用好的转染试剂做个对照看看是不是pei问题

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2017-04-13 07:24:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西湖鸟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果觉得lipo2000贵，可以用RFect小核酸转染试剂，我现在就是用的这个试剂，价格便宜，做Hela细胞的siRNA转染做到90%以上，48hqPCR检测的，没看荧光，荧光不准的。
赞一下 回复此楼
5楼2018-10-16 13:14:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西湖鸟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果觉得lipo2000贵，可以用RFect小核酸转染试剂，我现在就是用的这个试剂，价格便宜，做Hela细胞的siRNA转染做到90%以上，48hqPCR检测的，没看荧光，荧光不准的。
赞一下 回复此楼
6楼2018-10-17 14:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

别踩我的菜

新虫 (小有名气)
楼主可以看看siRNA设置梯度了吗？最好用带荧光的siRNA对照转转看是否转进去了，需要用专用转染试剂才可以，朋友给我推荐了RFect悬浮细胞专用小核酸转染试剂，我用在Hela细胞上做到70%的转染效率，可能条件需要在优化一下就更好了。
赞一下 回复此楼
7楼2019-03-27 15:14:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 五点五 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭