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五点五

新虫 (初入文坛)

[求助] 实验告急,,,用Hela细胞进行转染,效率低怎么回事!求大神指点! 已有1人参与

1.用PEI药转,质粒上连接的目的基因相对较大,有GFP可以看荧光,但是空质粒也看不到荧光。
2.老师不想用lip2000,有些贵!
3.目前hela细胞长的也比较慢,但是形态还可以,我认为血清不好导致的。想问问换一个好血清会提高转染效率吗?
4.转了好久了,都不行,但是293T转的非常好,可以看到一片荧光。
求大神指点,感激不尽!

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科研用户

禁言 (正式写手)

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2楼2017-04-11 13:41:40
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Cruiser肖

金虫 (正式写手)

3楼2017-04-13 07:23:45
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Cruiser肖

金虫 (正式写手)

照理说hela很好转,可以用好的转染试剂做个对照看看是不是pei问题

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4楼2017-04-13 07:24:55
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西湖鸟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果觉得lipo2000贵,可以用RFect小核酸转染试剂,我现在就是用的这个试剂,价格便宜,做Hela细胞的siRNA转染做到90%以上,48hqPCR检测的,没看荧光,荧光不准的。
5楼2018-10-16 13:14:28
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西湖鸟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果觉得lipo2000贵,可以用RFect小核酸转染试剂,我现在就是用的这个试剂,价格便宜,做Hela细胞的siRNA转染做到90%以上,48hqPCR检测的,没看荧光,荧光不准的。
6楼2018-10-17 14:59:25
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)

楼主可以看看siRNA设置梯度了吗?最好用带荧光的siRNA对照转转看是否转进去了,需要用专用转染试剂才可以,朋友给我推荐了RFect悬浮细胞专用小核酸转染试剂,我用在Hela细胞上做到70%的转染效率,可能条件需要在优化一下就更好了。
7楼2019-03-27 15:14:44
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