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也是小白

。

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11楼2017-03-31 00:29:17

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伊巴代提

新虫 (初入文坛)

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专业: 植物遗传学

可以试一下降落式PCR或者延长一下最后一步骤中72℃。

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12楼2017-03-31 07:43:19

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lusandanooo

银虫 (小有名气)

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专业: 林产化学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
15978432804: 金币+2, ★有帮助 2017-03-31 23:34:12

以我的经验，做巢式PCR，估计你这个基因附近的序列不适合做引物，可以多选上下游1000bp，设计外巢引物，换P长片段的酶，比如LA taq，Primer star这种，内巢引物用你现在设计的这个就行了。我之前也是P一个3k多的片段P不出来，试了上面人说的方法都没用，最后巢式P出来的。

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毕了业真开心嘻嘻嘻嘻嘻

13楼2017-03-31 09:45:28

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困困的黄瓜

铁虫 (著名写手)

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专业: 食品科学基础

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14楼2017-03-31 10:00:07

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15978432804

新虫 (小有名气)

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专业: 作物种质资源与遗传育种学

引用回帖:

13楼: Originally posted by lusandanooo at 2017-03-31 09:45:28
以我的经验，做巢式PCR，估计你这个基因附近的序列不适合做引物，可以多选上下游1000bp，设计外巢引物，换P长片段的酶，比如LA taq，Primer star这种，内巢引物用你现在设计的这个就行了。我之前也是P一个3k多的片段 ...

好的，我再试试

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15楼2017-03-31 23:35:08

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