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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 如何合理的设计引物
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也是小白
。

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11楼2017-03-31 00:29:17
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伊巴代提

新虫 (初入文坛)
可以试一下降落式PCR或者延长一下最后一步骤中72℃。

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12楼2017-03-31 07:43:19
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lusandanooo

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
15978432804: 金币+2, ★有帮助 2017-03-31 23:34:12
以我的经验，做巢式PCR，估计你这个基因附近的序列不适合做引物，可以多选上下游1000bp，设计外巢引物，换P长片段的酶，比如LA taq，Primer star这种，内巢引物用你现在设计的这个就行了。我之前也是P一个3k多的片段P不出来，试了上面人说的方法都没用，最后巢式P出来的。
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毕了业真开心嘻嘻嘻嘻嘻
13楼2017-03-31 09:45:28
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困困的黄瓜

铁虫 (著名写手)
有相关PPT

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14楼2017-03-31 10:00:07
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15978432804

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by lusandanooo at 2017-03-31 09:45:28
以我的经验，做巢式PCR，估计你这个基因附近的序列不适合做引物，可以多选上下游1000bp，设计外巢引物，换P长片段的酶，比如LA taq，Primer star这种，内巢引物用你现在设计的这个就行了。我之前也是P一个3k多的片段 ...

好的，我再试试

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15楼2017-03-31 23:35:08
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15978432804

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 困困的黄瓜 at 2017-03-31 10:00:07
有相关PPT

可以发个链接吗

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16楼2017-03-31 23:35:45
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邹忌

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
15978432804: 金币+2, ★有帮助 2017-04-02 09:45:31
如果想获得相关的序列，而做PCR没有很好的办法，可以做基因合成的！
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不是不能，只是不想
17楼2017-04-02 09:40:58
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15978432804

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 邹忌 at 2017-04-02 09:40:58
如果想获得相关的序列，而做PCR没有很好的办法，可以做基因合成的！

这样有点麻烦啊

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18楼2017-04-02 09:45:09
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