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不吃M的鱼

金虫 (小有名气)

[求助] 融合蛋白质粒构建酶切位点选择

想构建一个质粒,融合EGFP。linker用的GGGGS X3 linker(有搜到别人做的用BamH1做酶切位点的。图谱是A-BamH1-linker-B)。我现在构建质粒的时候BamH1不能用,我就换成Afl2了,可是老板说BamH1是GS是a折叠的,别人试过不影响。说我的Afl2可能影响蛋白折叠了。听的迷迷糊糊的,希望有大神告诉我一下,有没有文献报可以用Afl2的?是不是影响了?还有如果我用overlap做,是不是可以不要BamH1?谢谢!

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sdlgwcq

新虫 (初入文坛)

当然可以,直接重叠PCR把他们搞在一起再往载体上连了。
2楼2017-04-25 01:19:58
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