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wjgsunny金虫 (正式写手)
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[交流]
液相色谱柱柱压很高怎么办啊？
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我们用的ultimate 250mm 的C18液相色谱柱，发现现在柱压非常高怎么办啊？现在不能换柱子，因为已经做了一部分数据！流动相用的是CH3OH-0.2%HAc(H2O),就是样品的粘度有点大，但是所有的样品均溶于甲醇和水。 我用异丙醇（色谱级）活化过2h(0.2ml/min),然后用甲醇冲洗了一晚上（0.2ml/min）,今天开机柱压仍然很高，快到24Mpa了！真的是痛苦！ 各位有什么办法吗？ |
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压力高简单的讲就是堵，可能是管路也可能是柱子。楼主每次做完实验冲洗的时间也太短了，各10分钟肯定不够的，很多杂质在柱子里还没出来就被你换成另外一种流动相了，长此以往柱子当然会堵。我以前也遇到过，机器给学生用了一学期，做完随便冲一下就等不及的要走，结果一开机压力就快到最大压力。建议先把柱子卸了，调高柱温箱温度，用纯水冲冲管路，也可以换另一边柱温箱用用，就是柱外体积有会差别不会有太多影响。如果是柱子建议用以下方法彻底冲洗：95水5甲醇冲洗1小时，换成100甲醇冲洗1小时，100乙腈1小时，100异丙醇1小时，100正己烷一小时，再按照这个反过来冲一遍，基本会好。如果是缓冲盐堵得太厉害就只有反冲了，那是死马当活马医，反冲后柱子寿命也就差不多了。 |
16楼2011-03-23 23:46:02
2楼2008-12-29 10:59:35
3楼2008-12-29 11:11:38
4楼2008-12-29 11:14:28