24小时热门版块排行榜    

查看: 5887  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wjgsunny

金虫 (正式写手)

[交流] 液相色谱柱柱压很高怎么办啊?

我们用的ultimate 250mm 的C18液相色谱柱,发现现在柱压非常高怎么办啊?现在不能换柱子,因为已经做了一部分数据!流动相用的是CH3OH-0.2%HAc(H2O),就是样品的粘度有点大,但是所有的样品均溶于甲醇和水。
   我用异丙醇(色谱级)活化过2h(0.2ml/min),然后用甲醇冲洗了一晚上(0.2ml/min),今天开机柱压仍然很高,快到24Mpa了!真的是痛苦!
   各位有什么办法吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuefang818

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wjgsunny at 2008-12-29 10:28:13:
我们用的ultimate 250mm 的C18液相色谱柱,发现现在柱压非常高怎么办啊?现在不能换柱子,因为已经做了一部分数据!流动相用的是CH3OH-0.2%HAc(H2O),就是样品的粘度有点大,但是所有的样品均溶于甲醇和水。
   我 ...

压力高简单的讲就是堵,可能是管路也可能是柱子。楼主每次做完实验冲洗的时间也太短了,各10分钟肯定不够的,很多杂质在柱子里还没出来就被你换成另外一种流动相了,长此以往柱子当然会堵。我以前也遇到过,机器给学生用了一学期,做完随便冲一下就等不及的要走,结果一开机压力就快到最大压力。建议先把柱子卸了,调高柱温箱温度,用纯水冲冲管路,也可以换另一边柱温箱用用,就是柱外体积有会差别不会有太多影响。如果是柱子建议用以下方法彻底冲洗:95水5甲醇冲洗1小时,换成100甲醇冲洗1小时,100乙腈1小时,100异丙醇1小时,100正己烷一小时,再按照这个反过来冲一遍,基本会好。如果是缓冲盐堵得太厉害就只有反冲了,那是死马当活马医,反冲后柱子寿命也就差不多了。
16楼2011-03-23 23:46:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

花木兰2010

银虫 (初入文坛)

★
wjgsunny(金币+1,VIP+0):谢谢你的回复!我每次做完都用甲醇:水=80:20,然后用20:80,然后甲醇,各十分钟!
你用10%的甲醇和90%的水冲,不要单纯的用有机相。你试试,应该能行。
2楼2008-12-29 10:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kkroy

铜虫 (小有名气)

★
wjgsunny(金币+1,VIP+0):谢谢你的回复!
楼上正解,人家Agilent也说过50%IPA溶液是个好东东啊,你试试吧
3楼2008-12-29 11:11:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kkroy

铜虫 (小有名气)

★
wjgsunny(金币+1,VIP+0):谢谢你的建议,你反冲过柱子没,反冲冲洗流动相组成是怎么样的啊?我师兄说色谱柱反冲会使柱效降低!所以我想先了解清楚!
如果是不溶解在流动相的东西,你可以试着反冲,0.2~0.4ml/min,压力最好别超过40BAR,冲个1~2h左右,对了你有用保护柱嘛?
4楼2008-12-29 11:14:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:34 by Xc2FxHsHkBNc
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 5/250 2026-11-07 16:17 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-06 13:49 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
请填处理意见