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wjgsunny金虫 (正式写手)
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[交流]
液相色谱柱柱压很高怎么办啊?
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我们用的ultimate 250mm 的C18液相色谱柱,发现现在柱压非常高怎么办啊?现在不能换柱子,因为已经做了一部分数据!流动相用的是CH3OH-0.2%HAc(H2O),就是样品的粘度有点大,但是所有的样品均溶于甲醇和水。 我用异丙醇(色谱级)活化过2h(0.2ml/min),然后用甲醇冲洗了一晚上(0.2ml/min),今天开机柱压仍然很高,快到24Mpa了!真的是痛苦! 各位有什么办法吗? |
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压力高简单的讲就是堵,可能是管路也可能是柱子。楼主每次做完实验冲洗的时间也太短了,各10分钟肯定不够的,很多杂质在柱子里还没出来就被你换成另外一种流动相了,长此以往柱子当然会堵。我以前也遇到过,机器给学生用了一学期,做完随便冲一下就等不及的要走,结果一开机压力就快到最大压力。建议先把柱子卸了,调高柱温箱温度,用纯水冲冲管路,也可以换另一边柱温箱用用,就是柱外体积有会差别不会有太多影响。如果是柱子建议用以下方法彻底冲洗:95水5甲醇冲洗1小时,换成100甲醇冲洗1小时,100乙腈1小时,100异丙醇1小时,100正己烷一小时,再按照这个反过来冲一遍,基本会好。如果是缓冲盐堵得太厉害就只有反冲了,那是死马当活马医,反冲后柱子寿命也就差不多了。 |
16楼2011-03-23 23:46:02
2楼2008-12-29 10:59:35
3楼2008-12-29 11:11:38
4楼2008-12-29 11:14:28













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