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基因克隆,紧急求助!
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1、将PCR产物酶切后与同样酶切的载体连接,同样条件做了一个载体自连的阴性对照,可是转化后的平板上载体自连的阴性对照比克隆目的基因的连接菌斑数目多好几倍,请问这是为什么啊? 2、将上述目的基因的连接菌斑做菌落PCR或提质粒酶切很难出现阳性克隆,这又是为什么呢? 如蒙各位赐教,不胜感激!谢谢! |
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