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zyd958078901

新虫 (初入文坛)

[求助] 小鼠剪尾巴后,粗提dna,做pcr,条带不亮,

小鼠剪尾巴后,粗提dna,做pcr,条带不亮,

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zyd958078901

新虫 (初入文坛)

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1楼: Originally posted by zyd958078901 at 2017-03-22 16:02:51
小鼠剪尾巴后,粗提dna,做pcr,条带不亮,

小鼠剪尾巴后,粗提dna,做pcr,1200bp的目的条带,不亮,引物特异性不是很好,但原来师姐做的时候目的条带会很亮。
原来的体系是
ddH2O      22.5
5QReaction buffer    10
5QHigh QCEnhancer 10
dNTP(10mM)  1
F primer                2
R primer               2
Q5DNA polymerase      0.5
DNA template                2

98℃      3min
98          30s
60          30s
72          1min
72          5min
12          forever
不知道为什么现在不亮

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2楼2017-03-22 16:14:00
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zyd958078901

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zyd958078901 at 2017-03-22 16:14:00
小鼠剪尾巴后,粗提dna,做pcr,1200bp的目的条带,不亮,引物特异性不是很好,但原来师姐做的时候目的条带会很亮。
原来的体系是
ddH2O      22.5
5QReaction buffer    10
5QHigh QCEnhancer 10
dNTP(10mM)  1
F ...

前面是师姐做的,后面是我做的,我用的是1kb的marker
小鼠剪尾巴后,粗提dna,做pcr,条带不亮,


小鼠剪尾巴后,粗提dna,做pcr,条带不亮,-1



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3楼2017-03-22 16:15:53
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