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柠檬可乐星新虫 (小有名气)
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求大神指导这个PCR程序是如何设置的已有2人参与
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如题，最近读的一篇文献里我的目的片段扩增程序是这样的：SSU rDNA was amplified by PCR in a total volume of 50ul. The thermal cycle parameters consisted of 40 cycles of 30 s at 94℃, 30 s at 50℃ and 120 s at 72℃, followed by 5 min at 72℃ for final extension. Partial SSU rDNA sequences were obtained by amplification with the primer pairs s14F3-s17 and s14F3-sB (primers described in Pawlowski, 2000). The obtained PCR products were used for reamplification with the primer pairs s14F1–s17 and s14F1–sB, using the same thermal cycle parameters during 25 cycles. 引物位置如下图 那么问题来了，在 amplification 的时候，s14F3-s17 and s14F3-sB （同理， s14F1–s17 and s14F1–sB）这两对引物是同时加到50ul的PCR体系里吗？ 之前没见过这种写法的，实在搞不明白这个PCR程序是怎么设置的，还请各位大神指导一二，多谢！！！  捕获.PNG |
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