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zhaoting2007

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】材料溶血率诸多问题请教

通过紫外分光光度计在545nm处测得吸光度,用公式(Dt-Dnc)/(Dpc-Dnc)计算得到的溶血率出现了负值,不知道是什么原因?
另外,还想问一下:测试结果跟实验所用管有无关系?跟离心时转速有无关系?跟所用抗凝剂有无关系?(我用的是ACD抗凝)

第一次测溶血率,请高手赐教,谢谢

[ Last edited by zhaoting2007 on 2008-12-28 at 20:30 ]
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fjnutiantian

金虫 (小有名气)

Dt,Dnc,Dpc数值是否准确?
思想在于交流,境界不断提升!
2楼2008-12-26 21:30:36
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yusen_1982

荣誉版主 (职业作家)

小木虫最高学位委员会主席


zhangwj(金币+1,VIP+0):嘿嘿~~
应该是正值,国家标准是5%,小于它就合格,越小越好
路漫漫其修远兮吾将上下而求索
3楼2008-12-26 23:21:47
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blackdust

金虫 (正式写手)

★ ★
zhangwj(金币+2,VIP+0):顾问金!
正常情况是不会出现负值的。道理很简单:阴性对照是不溶血,你的样品不可能比不溶血还更加不溶血。
仔细分析一下自己的实验方案和具体操作是否有误。祝你好运!
4楼2008-12-27 00:56:01
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blackdust

金虫 (正式写手)


wgcui(金币+1,VIP+0):欢迎应助! 3-4 08:37
引用回帖:
Originally posted by yusen_1982 at 2008-12-26 23:21:
应该是正值,国家标准是5%,小于它就合格,越小越好

5%是业内国际标准。
5楼2008-12-27 00:57:12
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zhaoting2007

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by blackdust at 2008-12-27 00:56:
正常情况是不会出现负值的。道理很简单:阴性对照是不溶血,你的样品不可能比不溶血还更加不溶血。
仔细分析一下自己的实验方案和具体操作是否有误。祝你好运!

谢谢!由于第一次做没有经验,不知下面几种情况会不会对其结果产生影响:

我是用紫外分光光度计测的吸光度,样品和阴性对照用的参比是生理盐水,阳性对照用的参比是蒸馏水,不知有没有问题?
另外,加入稀释血37°水浴1小时后,并没有马上离心,而是把样品取出等了约1小时后才离心的,是否有影响?
2500r/min离心5min,发现底部有轻微悬浮,认为没有离心好,又重新离心一遍,二次离心会不会对其结果产生影响?
6楼2008-12-27 12:12:14
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niepancn

银虫 (小有名气)



wgcui(金币+1,VIP+0):欢迎应助! 3-4 08:37
负值最大的可能是参比和测试组放反了。
7楼2008-12-27 16:40:31
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zhaoting2007

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by niepancn at 2008-12-27 16:40:
负值最大的可能是参比和测试组放反了。

参比放紫外分光光度计里面那个池子里,测试组放外面那个池子了
8楼2008-12-28 20:32:03
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hongjun_yang

金虫 (正式写手)


yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎常来生物材料版
实验一般用医用的塑料管或者玻璃的,转速在3000转左右,抗凝剂一般没有什么影响.如果出现负值有两种情况,一种就是说你的材料抗凝真的好,另外一种就是说你测试时候弄反了.
9楼2008-12-29 13:10:41
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hourx130

金虫 (小有名气)


yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎常来生物材料版 3-2 17:38
关于溶血率为负值,我做过试验中出现两次负值的情况,测试的时候参比和测试组是绝对没有放反的,得出材料的吸光度比阴性对照的稍小,结果就为负值了,最终原因没有弄清楚,又重复一遍试验,就变为正值了,但是材料的吸光度比阴性对照的稍大,几乎接近,可能原因还是材料本身对红细胞的破坏作用很小,几乎为零,试验过程稍有误差就会出现负值的情况。
10楼2009-03-02 16:34:13
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