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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 【求助】材料溶血率诸多问题请教
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zhaoting2007

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】材料溶血率诸多问题请教

通过紫外分光光度计在545nm处测得吸光度，用公式(Dt-Dnc)/(Dpc-Dnc)计算得到的溶血率出现了负值，不知道是什么原因？
另外，还想问一下：测试结果跟实验所用管有无关系？跟离心时转速有无关系？跟所用抗凝剂有无关系？（我用的是ACD抗凝）

第一次测溶血率，请高手赐教，谢谢

[ Last edited by zhaoting2007 on 2008-12-28 at 20:30 ]
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1楼 2008-12-26 21:19:48
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fjnutiantian

金虫 (小有名气)
Dt，Dnc，Dpc数值是否准确？
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思想在于交流，境界不断提升！
2楼2008-12-26 21:30:36
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yusen_1982

荣誉版主 (职业作家)

小木虫最高学位委员会主席
★
zhangwj(金币+1,VIP+0):嘿嘿～～
应该是正值,国家标准是5%,小于它就合格,越小越好
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路漫漫其修远兮吾将上下而求索
3楼2008-12-26 23:21:47
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blackdust

金虫 (正式写手)
★ ★
zhangwj(金币+2,VIP+0):顾问金！
正常情况是不会出现负值的。道理很简单：阴性对照是不溶血，你的样品不可能比不溶血还更加不溶血。
仔细分析一下自己的实验方案和具体操作是否有误。祝你好运！
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4楼2008-12-27 00:56:01
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blackdust

金虫 (正式写手)
★
wgcui(金币+1,VIP+0):欢迎应助！ 3-4 08:37
引用回帖:
Originally posted by yusen_1982 at 2008-12-26 23:21:
应该是正值,国家标准是5%,小于它就合格,越小越好

5%是业内国际标准。
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5楼2008-12-27 00:57:12
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zhaoting2007

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by blackdust at 2008-12-27 00:56:
正常情况是不会出现负值的。道理很简单：阴性对照是不溶血，你的样品不可能比不溶血还更加不溶血。
仔细分析一下自己的实验方案和具体操作是否有误。祝你好运！

谢谢！由于第一次做没有经验，不知下面几种情况会不会对其结果产生影响：

我是用紫外分光光度计测的吸光度，样品和阴性对照用的参比是生理盐水，阳性对照用的参比是蒸馏水，不知有没有问题？
另外，加入稀释血37°水浴1小时后，并没有马上离心，而是把样品取出等了约1小时后才离心的，是否有影响？
2500r/min离心5min，发现底部有轻微悬浮，认为没有离心好，又重新离心一遍，二次离心会不会对其结果产生影响？
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6楼2008-12-27 12:12:14
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niepancn

银虫 (小有名气)
★
wgcui(金币+1,VIP+0):欢迎应助！ 3-4 08:37
负值最大的可能是参比和测试组放反了。
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7楼2008-12-27 16:40:31
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zhaoting2007

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by niepancn at 2008-12-27 16:40:
负值最大的可能是参比和测试组放反了。

参比放紫外分光光度计里面那个池子里，测试组放外面那个池子了
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8楼2008-12-28 20:32:03
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hongjun_yang

金虫 (正式写手)
★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎常来生物材料版
实验一般用医用的塑料管或者玻璃的,转速在3000转左右,抗凝剂一般没有什么影响.如果出现负值有两种情况,一种就是说你的材料抗凝真的好,另外一种就是说你测试时候弄反了.
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9楼2008-12-29 13:10:41
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hourx130

金虫 (小有名气)
★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎常来生物材料版 3-2 17:38
关于溶血率为负值，我做过试验中出现两次负值的情况，测试的时候参比和测试组是绝对没有放反的，得出材料的吸光度比阴性对照的稍小，结果就为负值了，最终原因没有弄清楚，又重复一遍试验，就变为正值了，但是材料的吸光度比阴性对照的稍大，几乎接近，可能原因还是材料本身对红细胞的破坏作用很小，几乎为零，试验过程稍有误差就会出现负值的情况。
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10楼2009-03-02 16:34:13
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