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liting1028

新虫 (初入文坛)

[交流] 亚细胞定位计算问题

我想看看目的基因的亚细胞定位,先采用试剂盒将细胞质和细胞核分离,然后分别抽提RNA,最后进行qRT-PCR。可问题是:很多文献都采用2个内参,比如细胞质内参为GAPDH ,细胞核内参为U6。想要得出如下图所示的结果的话,应该用什么方法来计算定量结果?即理解不了1个基因怎么用2个内参?

亚细胞定位计算问题
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为梦想而奋斗!
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田生帅菜

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看来这个问题比较难,关注了两天没人回答。
从你给的图上可以看出,这两个内参在核内外的表达亮都不一样。也就是说,如果有一个内参,在细胞核内外的存在数量是一样的,那我们就可以用那个基因做内参,否则检出来的目的基因就是在不同标准下的比较了,不准确。
但是我觉得,你提供的图中gapdh或是u6,只要分别检他们在胞质和核内的量就行吧。欢迎讨论。

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-03-18 09:56:29
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liting1028

新虫 (初入文坛)

找了很久,都没有找到解决办法,希望各位大侠告知:测得Ct值之后是怎样计算的?
为梦想而奋斗!
3楼2017-03-23 22:08:28
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