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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 老师您好。我在做荧光偏振相关实验，5'端FAM标记的20多...
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一个鼻子

新虫 (初入文坛)

[求助] 老师您好。我在做荧光偏振相关实验，5'端FAM标记的20多...

老师您好。我在做荧光偏振相关实验，5'端FAM标记的20多bp的DNA序列，5-80nM梯度稀释，发现blank值特别大，用水用buffer都是。5-80nM的DNA的偏振值在几十到三百之间，重复之间的值差的也挺大，blank的值有好几千。 @biostar2009

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1楼2017-03-15 02:31:39
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chihezi

新虫 (初入文坛)
我也是，不知道为什么，buffer比实验组mP值还要高很多

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2楼2018-01-17 19:25:31
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慕木123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chihezi at 2018-01-17 19:25:31
我也是，不知道为什么，buffer比实验组mP值还要高很多

mP值是两个通道荧光值的相对值，可以看看那个公式，所以mP值大也是很正常的。我最近也在做这个实验，我遇到的问题是非特异性的结合，不知道你们是否也是做蛋白和蛋白相互作用呢
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3楼2018-03-14 09:40:54
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wanganqi

禁虫 (小有名气)
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4楼2018-03-29 11:36:25
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夕颜醉清风

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 慕木123 at 2018-03-14 09:40:54
mP值是两个通道荧光值的相对值，可以看看那个公式，所以mP值大也是很正常的。我最近也在做这个实验，我遇到的问题是非特异性的结合，不知道你们是否也是做蛋白和蛋白相互作用呢...

我是要做蛋白和DNA非特异性结合，用偏振光算KD值，不知道怎么把各向异性转换成Kd值

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5楼2018-12-14 21:00:26
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