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用磷酸盐做流动相经常堵塞单向阀，要怎么选择代替的流动相？ 已有2人参与
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我的流动相是A 磷酸二氢铵（pH7.4):甲醇=95：5 B 甲醇：磷酸二氢铵（pH7.4)=95：5 先5%B2min，接着梯度升至60%B到20min，保持60%B15min，整个过程35min。流速为1ml/min。 每次都是头一天跑完没有问题，但是柱压很高达到2500psi，然后第二天在用同样的方法跑，就会堵塞单向阀，用的是waters e2695，出故障的时候显示lost prime，应该就是单向阀堵了。 是不是因为我用的是磷酸盐，所以它结晶了堵了，还是因为单向阀确实太脏了，因为之前也堵了好几次。 如果是我的流动相的问题，我换成A磷酸二氢铵（pH 7.4）B甲醇，不将它们混合做流动相，会有所改善吗？ 还是我直接换成其他流动相，既然磷酸盐爱结晶，我可以替换成什么流动相才是比较合适的？  |
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wyy080214
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4楼2017-03-09 18:00:43
chuanqi_snk
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【答案】应助回帖
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1、首先，磷酸盐是HPLC中经常使用的缓冲液，应该不是造成压力高的主要原因，不确定你用的缓冲盐浓度多大，一般不建议超过50mmol,HPLC走缓冲盐溶液，一定要在使用前后，使用不含盐的溶液（例如10~20%的甲醇）充分冲洗。 2、其次，缓冲液的pH值呈弱碱性，长期使用的话，不知道色谱柱是否耐受； 3、最后，是否由于有机相甲醇比例多高，导致盐析出，建议优化流动性比例，例如：A相为缓冲盐：甲醇=8:2，B相为缓冲盐：甲醇=2:8 |
2楼2017-03-09 17:28:53
3楼2017-03-09 17:49:29
5楼2017-03-13 08:05:37
