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我跑SDS-PAGE时，泳道总是出现成片的蓝色，难以脱掉， 在跑胶的时候就可以看到分离胶部分，溴酚蓝指示前沿以上会出现黄色，这是为什么？ 另外，我的胶最下边出现两条带，我应该以哪一条作为溴酚蓝指示前沿，能否说明我的样品中有小分子量的蛋白？ 我用的是15%分离胶，5%浓缩胶，Marker的分力量范围是1.2KD-45KD，样品经过酸沉淀，PBS复溶，AKTA纯化。 求各位大神指点！谢谢！  IMG_1482.JPG |
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2楼2017-03-06 17:16:29
3楼2017-03-07 17:12:16
田生帅菜
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【答案】应助回帖
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-08 07:42:17
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哈哈，标记的意思是他想留个记号，以后好找这个留过言的帖子。 你这个胶给我的感觉是不是时间长了？上网缓冲液是自己配制的？ 肯定是应该看最前面的 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2017-03-07 23:11:53
5楼2017-03-08 11:35:17
田生帅菜
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【答案】应助回帖
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你的溴酚蓝变黄是因为ph变化了，因为我看你写了，你是酸纯化的蛋白，再用PBS溶的，不知道你用akta怎么纯化的，即使过柱了，也可能酸性很大，所以溴酚蓝变黄。我猜测你这一板子上可能有纯化前，和纯化时多个时间点的收样，ph对纯化的很重要的，不知道你能否确定蛋白确实经过了纯化。你可以把你加样顺序写上。 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2017-03-08 21:58:31
7楼2017-03-09 10:05:54
borrysa
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8楼2017-03-09 12:41:22
9楼2017-03-09 20:46:36
10楼2017-03-10 10:51:56