| 查看: 7788 | 回复: 4 | ||
[求助]
MBP标签蛋白纯化 已有2人参与
|
|
我用pMAL_c2G表达纯化蛋白，带MBP标签，用直链淀粉树脂来洗脱，但是会有很多杂蛋白洗脱下来，怎么调整才能让杂蛋白少一些？用的麦芽糖浓度为10mM,这个洗脱浓度大一些还是小一些？洗脱的速度快一些还是慢一些？怎样减少杂蛋白和柱子的结合？谢谢～ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有110人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
-
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner
已经有0人回复
-
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗
已经有0人回复
-
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner
已经有0人回复
-
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
2楼2017-04-03 11:35:38
medi812
新虫 (初入文坛)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 53.2
- 帖子: 20
- 在线: 1.9小时
- 虫号: 5918349
- 注册: 2017-03-10
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
|
首先任何亲和色谱的纯度都不会很高 除非你的蛋白表达量非常大 上样的时候可以稍微加快速度来降低杂志的非特异性结合 或者在你的buffer里加少量的竞争性物质来抑制那些弱的结合 洗脱过程没太大影响 可以试试稍微多洗几次 或是用很低浓度的麦芽糖洗一次 总之 亲和之后一般都需要离子交换 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2017-04-03 21:38:56
4楼2017-12-28 17:36:40
yubeihong
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 7537.3
- 散金: 605
- 红花: 40
- 帖子: 3051
- 在线: 641小时
- 虫号: 253258
- 注册: 2006-05-20
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
5楼2019-09-20 18:24:08