| 查看: 7750 | 回复: 4 | ||
[求助]
MBP标签蛋白纯化 已有2人参与
|
|
我用pMAL_c2G表达纯化蛋白，带MBP标签，用直链淀粉树脂来洗脱，但是会有很多杂蛋白洗脱下来，怎么调整才能让杂蛋白少一些？用的麦芽糖浓度为10mM,这个洗脱浓度大一些还是小一些？洗脱的速度快一些还是慢一些？怎样减少杂蛋白和柱子的结合？谢谢～ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
-
透明质酸酶的作用机制：如何实现药物递送
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有185人回复
-
爱思维尔旗下LWT投稿
已经有9人回复
-
替拉扎明为缺氧选择性细胞毒药物研究提供新思路
已经有0人回复
-
拉坦前列腺素(Latanoprost)：前列腺素F2α衍生物如何成为青光眼一线用药
已经有0人回复
-
卟啉家族中的明星分子：MESO-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉的性质与制备
已经有1人回复
-
宠物寄生虫防治：氟雷拉纳阻断GABA受体，持效12周驱杀跳蚤蜱虫
已经有0人回复
-
为呼吸打开通道：依伐卡托的科学之旅
已经有1人回复
-
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
-
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
2楼2017-04-03 11:35:38
medi812
新虫 (初入文坛)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 53.2
- 帖子: 20
- 在线: 1.9小时
- 虫号: 5918349
- 注册: 2017-03-10
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
|
首先任何亲和色谱的纯度都不会很高 除非你的蛋白表达量非常大 上样的时候可以稍微加快速度来降低杂志的非特异性结合 或者在你的buffer里加少量的竞争性物质来抑制那些弱的结合 洗脱过程没太大影响 可以试试稍微多洗几次 或是用很低浓度的麦芽糖洗一次 总之 亲和之后一般都需要离子交换 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2017-04-03 21:38:56
4楼2017-12-28 17:36:40
yubeihong
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 7537.3
- 散金: 605
- 红花: 40
- 帖子: 3051
- 在线: 641小时
- 虫号: 253258
- 注册: 2006-05-20
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
5楼2019-09-20 18:24:08
精华III:
20