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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 核酸凝胶电泳跑的不好看
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女少年93

新虫 (初入文坛)

[求助] 核酸凝胶电泳跑的不好看 已有4人参与

实验小白一枚，昨天试着做了凝胶电泳，跑的marker，电压120V，时间30min，请大家帮忙看看，是不是跑的时间太久了，还是电压高了？谢谢!

核酸凝胶电泳跑的不好看
核酸marker电泳.jpg
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1楼 2017-03-02 10:00:19
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

1135482512

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 女少年93 at 2017-03-02 11:00:46
0.4g琼脂糖，40mlTBE，冷却一段时间后加的EB，会有啥问题呀
...

比如胶溶解不充分，你可以在试一次

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4楼2017-03-02 11:05:05
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Hauber

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-03 21:14:02
溶胶不充分，可以多煮一会

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5楼2017-03-02 11:10:04
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女少年93

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 1135482512 at 2017-03-02 10:09:59
是不是你配胶有问题

0.4g琼脂糖，40mlTBE，冷却一段时间后加的EB，会有啥问题呀

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3楼2017-03-02 11:00:46
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ken19860823

木虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-03 21:09:44
tbe没用错吧，0.5x的120v应该还好。换缓冲液，太久的缓冲液离子强度大，缓冲液用前混一混，电压降到105左右试试，

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做基因修饰的老菜鸡
6楼2017-03-02 13:19:36
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MaxInTheWind

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-03 21:08:52
带跟带离太近：加琼脂浓度到1.5%，降电压到90V，多跑一阵比如一个小时
带中间有凹陷：琼脂没完全溶解或混合不均匀，多加热几秒，倒模具之前多摇几下
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11楼2017-03-03 10:17:53
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普通回帖

1135482512

铁杆木虫 (著名写手)
是不是你配胶有问题

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2楼2017-03-02 10:09:59
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烟柳青凝黛

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我做过180v  20min，跑出来很好，1%琼脂糖
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成王败寇
7楼2017-03-02 14:06:48
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wsywxs

木虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-03 21:09:12
胶浓度有点低，加大浓度可以跑的更久些，条带能分的更开些。

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8楼2017-03-02 18:56:02
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晒太阳的小木

铜虫 (初入文坛)
缓冲液换新的

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9楼2017-03-02 22:31:16
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康小健

新虫 (正式写手)
胶是百分之几？电压可以小点100左右，marker是不是有污染？

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10楼2017-03-03 10:14:18
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