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蛋白质电泳 已有2人参与
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| 做蛋白质电泳为什么只有marker有带，样品都没有带，是不是提取的蛋白质上样前要处理（纯化）下，怎么处理呢？ |
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2楼2017-03-01 15:40:07
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染了考马斯亮蓝过夜。氯醋酸—丙酮沉淀法 1、在液氮中研磨叶片 2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜，然后离心（4℃8000rpm以上1小时）弃上清。 3、加入等体积的冰浴丙酮（含0.07%的β-巯基乙醇），摇匀后离心（4℃8000rpm以上1小时），然后真空干燥沉淀，备用。 4、上样前加入裂解液，室温放置30分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心（15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准），可临时保存在4℃待用。 5、用Brandford法定量蛋白，然后可分装放入-80℃备用。 药品：提取液：含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮。裂解液：2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml灭菌的去离子水中（终体积为5ml），使用前再加入1M的DTT65ul/ml 老师叫我参照此法处理下蛋白质，我都看不懂 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-03-01 15:53:28
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4楼2017-03-01 16:37:32
prthefu
木虫 (著名写手)
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