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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助大神Q-PCR中绝对定量问题
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)

[求助] 求助大神Q-PCR中绝对定量问题 已有2人参与

如题，我实验中需要对三个目的基因进行绝对定量，得出浓度是多少copies/ml，打算选择16S作为管家基因，我想了两种方案进行定量，各位大神们帮我看下是否可行：1.购买16S的标准品，对水体中16S进行绝对定量，然后以16S作为管家基因，对目的基因进行相对定量，根据二者的比值计算出目的基因的拷贝数；2.利用Fish技术设计16S的探针，直接检测水体中16S的浓度，然后以16S作为管家基因，对目的基因进行相对定量，根据二者的比值计算出目的基因的拷贝数。因为我只做过相对定量Q-PCR，绝对定量Q-PCR和Fish都没有做过，就不知道这样是否可行，求教做过的分子生物学大神们！
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1楼 2017-02-25 20:40:44
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预估预估

新虫 (正式写手)
请教一下相对定量怎么做的？

发自小木虫Android客户端
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我就是我，我就是人间不一样的烟火。
2楼2017-02-26 18:19:34
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dovekaoyan: 金币+5, ★有帮助 2017-02-27 09:07:28
标准品需要知道模板的分子量，可计算其拷贝数。
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3楼2017-02-26 20:37:12
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-02-26 20:37:12
标准品需要知道模板的分子量，可计算其拷贝数。

我第一个想法是否可行？
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4楼2017-02-27 09:07:01
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dovekaoyan at 2017-02-27 09:07:01
我第一个想法是否可行？...

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

dovekaoyan
5楼2017-02-27 09:11:27
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-02-27 09:11:27
...

可行吗？
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6楼2017-02-27 09:57:08
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20071213001

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主，第一种方法中二者的比值指的是什么呢？我也想用第一种方法~
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7楼2018-01-19 12:41:28
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玛德西亚

新虫 (初入文坛)
求教楼主如何计算16s基因拷贝数？

发自小木虫IOS客户端
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8楼2018-12-08 03:33:46
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