24小时热门版块排行榜    

查看: 2624  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dovekaoyan

木虫 (正式写手)

[求助] 求助大神Q-PCR中绝对定量问题 已有2人参与

如题,我实验中需要对三个目的基因进行绝对定量,得出浓度是多少copies/ml,打算选择16S作为管家基因,我想了两种方案进行定量,各位大神们帮我看下是否可行:1.购买16S的标准品,对水体中16S进行绝对定量,然后以16S作为管家基因,对目的基因进行相对定量,根据二者的比值计算出目的基因的拷贝数;2.利用Fish技术设计16S的探针,直接检测水体中16S的浓度,然后以16S作为管家基因,对目的基因进行相对定量,根据二者的比值计算出目的基因的拷贝数。因为我只做过相对定量Q-PCR,绝对定量Q-PCR和Fish都没有做过,就不知道这样是否可行,求教做过的分子生物学大神们!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dovekaoyan

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-02-26 20:37:12
标准品需要知道模板的分子量,可计算其拷贝数。

我第一个想法是否可行?
4楼2017-02-27 09:07:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

预估预估

新虫 (正式写手)

请教一下相对定量怎么做的?

发自小木虫Android客户端
我就是我,我就是人间不一样的烟火。
2楼2017-02-26 18:19:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dovekaoyan: 金币+5, 有帮助 2017-02-27 09:07:28
标准品需要知道模板的分子量,可计算其拷贝数。
3楼2017-02-26 20:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dovekaoyan at 2017-02-27 09:07:01
我第一个想法是否可行?...

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2017-02-27 09:11:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 293求调剂 +6 加一一九 2026-03-24 6/300 2026-03-24 14:29 by JourneyLucky
[考研] 081700 调剂 267分 +9 迷人的哈哈 2026-03-23 9/450 2026-03-24 11:58 by 544594351
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料,材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 材料与化工328分调剂 +4 。,。,。,。i 2026-03-23 4/200 2026-03-24 11:03 by 544594351
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见