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dovekaoyan

木虫 (正式写手)

[求助] 求助大神Q-PCR中绝对定量问题 已有2人参与

如题,我实验中需要对三个目的基因进行绝对定量,得出浓度是多少copies/ml,打算选择16S作为管家基因,我想了两种方案进行定量,各位大神们帮我看下是否可行:1.购买16S的标准品,对水体中16S进行绝对定量,然后以16S作为管家基因,对目的基因进行相对定量,根据二者的比值计算出目的基因的拷贝数;2.利用Fish技术设计16S的探针,直接检测水体中16S的浓度,然后以16S作为管家基因,对目的基因进行相对定量,根据二者的比值计算出目的基因的拷贝数。因为我只做过相对定量Q-PCR,绝对定量Q-PCR和Fish都没有做过,就不知道这样是否可行,求教做过的分子生物学大神们!
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dovekaoyan: 金币+5, 有帮助 2017-02-27 09:07:28
标准品需要知道模板的分子量,可计算其拷贝数。
3楼2017-02-26 20:37:12
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新虫 (正式写手)

请教一下相对定量怎么做的?

发自小木虫Android客户端
我就是我,我就是人间不一样的烟火。
2楼2017-02-26 18:19:34
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-02-26 20:37:12
标准品需要知道模板的分子量,可计算其拷贝数。

我第一个想法是否可行?
4楼2017-02-27 09:07:01
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dovekaoyan at 2017-02-27 09:07:01
我第一个想法是否可行?...

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2017-02-27 09:11:27
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