| 查看: 1897 | 回复: 5 | |||
[交流]
外源质粒DNA转化大肠杆菌 已有3人参与
|
|
摘要：转化是将外源DNA分子通过物理或化学的方法导入基因工程细菌中的过程,是基因工程等研究领域的基本实验技术之一。 1 .实验简介 转化是将外源DNA分子通过物理或化学的方法导入基因工程细菌中的过程,是基因工程等研究领域的基本实验技术之一。现演示利用化学的方法(热击法)：使用化学试剂(如CaCl2)制备的感受态细胞,通过热击处理将载体DNA分子导入大肠杆菌细胞中。 实验中使用的主要仪器：电热恒温水槽 超净工作台 台式离心机 电热恒温震荡器 电热恒温 培养箱 2. 热击 DNA连接产物与大肠杆菌感受态细胞冰浴30min后,放置42摄氏度水浴锅中,热击90秒,后迅速将大肠杆菌转移到冰水中放置2-3min。 3 .大肠杆菌复苏 上步热击后,一般都要对菌体进行一次复苏过程,向热击加入600-800 ul37摄氏度预热的无抗生素LB培养基后,置于摇床上37氏度,150rpm复苏培养45～60min。 4 .涂板培养 复苏后,收集的菌体去除部分上清液,预留100ul左右的菌液悬浮,用移液枪将重悬的菌加到抗性固体LB培养基中,用涂棒将菌涂布均匀,37摄氏度倒置培养12小时。 |
回复此楼» 猜你喜欢
312求调剂
已经有5人回复
-
网络空间安全0839招调剂
已经有4人回复
-
329求调剂
已经有3人回复
-
【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额
已经有8人回复
-
085602 289分求调剂
已经有7人回复
-
材料学硕333求调剂
已经有4人回复
-
各位老师您好：本人初试372分
已经有6人回复
-
334分 一志愿武理-080500 材料求调剂
已经有3人回复
-
0854电子信息求调剂
已经有9人回复
-
347求调剂
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2017-03-05 08:26:24
Zhibao1994
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1028.3
- 红花: 2
- 帖子: 210
- 在线: 36.3小时
- 虫号: 6143795
- 注册: 2017-03-25
- 专业: 植物病理学
3楼2017-05-08 23:56:04
4楼2018-01-11 10:00:15
5楼2018-01-11 10:12:35
6楼2018-01-11 11:01:54
