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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 细胞水平上验证基因敲除的方法
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maruochen

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞水平上验证基因敲除的方法 已有2人参与

想咨询一下，在细胞水平上做CRISPR的基因敲除后，如何检测，现在市面上大多数都是T7EN1试剂盒，还有没有别的可以取代它的？
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低着头走路，夹着尾巴做人
1楼 2017-02-22 11:29:21
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ken19860823

木虫 (正式写手)
之前实验室会用pjl4的载体克隆目的片段，如果有切割就会有荧光。另外如果转染效率高，测二十个序就可以了，一般293t这种细胞只要位点不要太特殊，百分之25的切割效率是有的

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做基因修饰的老菜鸡
6楼2017-04-05 19:18:41
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
T7E1是验证打靶效率的。也可以选择限制性内切酶酶切位点进行打靶。
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
2楼2017-02-22 17:17:03
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

pcr扩增敲除片段，然后测序
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···
4楼2017-03-23 14:49:40
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固液分离
1

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-03-23 19:27:31
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