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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 同一蛋白在HPLC测的纯度>99%，而UPLC上出现峰裂分
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huangts123

至尊木虫 (著名写手)
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20楼: Originally posted by llw1986 at 2017-03-01 17:25:47
这就尴尬了 光看你图忘记你做的是蛋白了，突然想起个问题 你UPLC和HPLC用的是同一根柱子吗？...

不是的啊。HPLC用的是Symmetry300 C4 5um 4.6*250mm色谱柱；UPLC用的是BEH300 C4,1.7um，2.1*100mm色谱柱
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21楼2017-03-02 08:08:45
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llw1986

专家顾问 (正式写手)
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21楼: Originally posted by huangts123 at 2017-03-02 08:08:45
不是的啊。HPLC用的是Symmetry300 C4 5um 4.6*250mm色谱柱；UPLC用的是BEH300 C4,1.7um，2.1*100mm色谱柱...

那就找到原因了 不同的色谱柱出峰不一样是可以理解的，UPLC的两个峰应该是两个物质 只是你用HPLC检测的时候用的那个柱子可能对其中一个不敏感 所以检测不到 而你换了UPLC的柱子能检测到的东西变多了 这是情有可原的。
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22楼2017-03-02 11:33:56
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huangts123

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
22楼: Originally posted by llw1986 at 2017-03-02 11:33:56
那就找到原因了 不同的色谱柱出峰不一样是可以理解的，UPLC的两个峰应该是两个物质 只是你用HPLC检测的时候用的那个柱子可能对其中一个不敏感 所以检测不到 而你换了UPLC的柱子能检测到的东西变多了 这是情有可原的 ...

请问，有没有可能是蛋白质的不同亚型导致的？
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23楼2017-03-02 12:50:57
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llw1986

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
23楼: Originally posted by huangts123 at 2017-03-02 12:50:57
请问，有没有可能是蛋白质的不同亚型导致的？...

应该不会是不同的亚型吧，不同的亚型应该分不开的
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24楼2017-03-02 13:04:11
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huangts123

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
24楼: Originally posted by llw1986 at 2017-03-02 13:04:11
应该不会是不同的亚型吧，不同的亚型应该分不开的...

请问有哪些方法可以确定这两个峰中有一个为杂质或为两个不同亚型？（PS：LC-MS可行么？有没有相关文献，谢谢）
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25楼2017-03-02 14:55:32
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llw1986

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
25楼: Originally posted by huangts123 at 2017-03-02 14:55:32
请问有哪些方法可以确定这两个峰中有一个为杂质或为两个不同亚型？（PS：LC-MS可行么？有没有相关文献，谢谢）...

额 蛋白这块我也不是很在行，不过一般的LC-MS应该检测不了蛋白吧
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26楼2017-03-02 15:53:48
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huangts123

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
26楼: Originally posted by llw1986 at 2017-03-02 15:53:48
额 蛋白这块我也不是很在行，不过一般的LC-MS应该检测不了蛋白吧...

还是很谢谢您
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27楼2017-03-02 16:15:40
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